一种新型活细胞微管蛋白探针及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种新型活细胞微管蛋白探针及其构建方法和应用，探针由EGFP和SPASTIN蛋白1‑325位氨基酸组成，所述SPASTIN蛋白1‑325位氨基酸如SEQ ID NO.10所示，通过截短体版本，使SPASTIN蛋白失去了微管剪切的功能，减少了对细胞其他生理过程的干扰，并能够减少对其他非特异性结构的结合，提高探针的定位精度，可以更精准地定位到微管的特定区域或亚结构，减少背景干扰；克服了现有标记面临细胞功能干扰、光漂白以及毒性等问题，为微管动态变化及其在各种生物学过程中的角色深入理解提供了工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子标记领域，具体涉及一种新型活细胞微管蛋白探针，还涉及该探针的构建方法和应用。

技术介绍

1、微管是细胞骨架的重要组成部分，主要由α和β微管蛋白二聚体组装而成。它们在细胞内形成细长的管状结构，直径约为25nm，具有极高的稳定性和动态性。微管不仅为细胞提供机械支持，保持细胞形状，还参与细胞内物质的运输、细胞分裂以及细胞信号传递等多种关键生物过程。

2、微管的功能与其动态特性密切相关。微管能够通过加速或减缓二聚体的聚合和解聚来快速响应细胞的需求，这种动态变化对于细胞的正常功能至关重要。此外，微管还被视为药物开发的重要靶点。许多抗癌药物(如紫杉醇和长春新碱)通过影响微管的动态稳定性来抑制癌细胞的增殖。标记微管的状态和功能变化，有助于评估这些药物的效果，并为个性化治疗提供依据。因此，标记活细胞中的微管蛋白对于理解其动态行为和功能至关重要。

3、现有的标记技术主要包括使用荧光蛋白融合表达、化学荧光探针以及小分子染料等方法。其中，将荧光蛋白(如gfp、mcherry等)基因融合到微管蛋白(如α和β微管蛋白)的编码序列中，允许研究本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述探针由EGFP和SPASTIN蛋白1-325位氨基酸组成，所述SPASTIN蛋白1-325位氨基酸如SEQ ID NO.10所示。

2.根据权利要求1所述的新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。

3.根据权利要求1所述的新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述SPASTIN蛋白1-325位的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

4.权利要求1～3任一项所述新型活细胞微管蛋白探针标记活细胞微管中的应用。

5.权利要求1～3任一项所述新型活细...

【技术特征摘要】

1.一种新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述探针由egfp和spastin蛋白1-325位氨基酸组成，所述spastin蛋白1-325位氨基酸如seq id no.10所示。

2.根据权利要求1所述的新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述egfp的核苷酸序列如seq id no.7所示。

3.根据权利要求1所述的新型活细胞微管蛋白探针，其特征在于：所述spastin蛋白1-325位的核苷酸序列如seq id no.9所示。

4.权利要求1～3任一项所述新型活细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳童斐，杨凌紫，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：