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分离的Actin5C启动子及其构建方法和表达载体技术

技术编号:44545164 阅读:34 留言:0更新日期:2025-03-11 14:10
本申请提出了分离的Actin5C启动子及其构建方法和表达载体,所述分离的Actin5C启动子为野生型Actin5C启动子的部分区域,所述部分区域包括自转录起始位点下游方向第94位开始至上游方向400bp~600bp的区域。本申请分离的Actin5C启动子长度短,使得含有其的表达载体尺寸小,转染效率高。利用本申请的表达载体可以显著提高体外昆虫S2细胞的目标蛋白产量,科学研究和临床应用价值高。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物领域,具体地,本申请涉及分离的actin5c启动子及其构建方法和表达载体。


技术介绍

1、基因表达是通过物理、化学等技术方法将外源基因导入宿主细胞并使其完成转录翻译表达的核酸工具。通过将目的基因克隆到相应的载体上,利用载体骨架上的调控元件使基因能够在宿主细胞中大量转录并翻译,从而实现目的基因的过表达。基因表达载体通常包括启动子元件、增强子元件以及3’端未翻译区域(utr),在生物医学研究和工业应用中具有重要意义。通过基因表达系统,可以将外源基因导入到目标细胞中,并使其产生所需的蛋白。这对于研究基因功能、药物研发和工业生产等方面具有广泛重要的应用。

2、果蝇作为一种常用的模式动物,其稳定的遗传背景及与人类基因及细胞信号调控通路高度保守等的特性,使其在研究基因功能方面发挥着重要的作用。利用体外培养的果蝇schneider 2(s2)细胞进行基因操纵是研究基因功能的常用方法之一。s2细胞是一种从果蝇胚胎中分化得到的血液淋巴系细胞。目前应用于s2细胞的组成型基因表达载体,其启动子元件主要为actin5c和opie2等组成型启动子,而3’-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种分离的Actin5C启动子,其特征在于,所述分离的Actin5C启动子为野生型Actin5C启动子的部分区域,所述部分区域包括自转录起始位点下游方向第94位开始至上游方向400bp~600bp的区域。

2.根据权利要求1所述的分离的Actin5C启动子,其特征在于,所述野生型Actin5C启动子具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;

3.一种表达载体,其特征在于,包括:权利要求1或2所述分离的Actin5C启动子。

4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于,进一步包括:3’-UTR序列,所述3’-UTR序列包括SV40病毒的3’-U...

【技术特征摘要】

1.一种分离的actin5c启动子,其特征在于,所述分离的actin5c启动子为野生型actin5c启动子的部分区域,所述部分区域包括自转录起始位点下游方向第94位开始至上游方向400bp~600bp的区域。

2.根据权利要求1所述的分离的actin5c启动子,其特征在于,所述野生型actin5c启动子具有如seq id no:1所示的核苷酸序列;

3.一种表达载体,其特征在于,包括:权利要求1或2所述分离的actin5c启动子。

4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于,进一步包括:3’-utr序列,所述3’-utr序列包括sv40病毒的3’-utr序列、p10杆状病毒的3’-utr序列或果蝇k10基因的3’-utr序列;

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【专利技术属性】
技术研发人员:郑丽彭博倪建泉车沁耘韩玉婷邱雨浩谢艺嘉卢心怡李羽童王文婷贾昊冯乐贤莫梦琳
申请(专利权)人:清华大学
类型:发明
国别省市:

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