【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因克隆和组装，具体涉及一种基于red/et重组工程的质粒文库构建方法及其应用。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、合成生物学旨在通过设计-构建-测试-学习的代谢工程策略设计和重构生物系统，这些设计需要依托合适的工具才能建成与落地。而标准化的生物元件就是合成生物学的工具箱，因此，生物元件的获取、表征与共享是合成生物学发展中兼具必要性与重要性的一环。
3、由于高效表征方法的滞后性，目前已表征的生物元件远低于实际需求，且因已报道表征工作的不完整性，美国麻省理工大学建立的标准生物元件登记库(registry ofstandard biological parts,http://parts.igem.org/main_page)中收录的20,000多例生物元件中，已有超过200例元件出现故障。因此高效的元件表征与标准化方法的建立工作对于保证所挖掘生物元件的数量和质量具有
【技术保护点】
1.一种基于Red/ET重组工程的质粒文库构建方法，其特征在于，所述构建方法通过将DNA序列集和线性化表达载体的混合物共转化到宿主细胞中完成，其中，DNA序列集中每一序列两端均携带与线性化表达载体重组所需的同源序列；从而使每一DNA序列均能在宿主细胞内与线性化表达载体经同源重组构建得到环形质粒。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述同源序列的长度为50bp。
3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述宿主细胞为建立有Red/ET重组工程的细菌宿主细胞，具体的，所述细菌宿主细胞至少能够表达RecE和RecT。
4.如...
【技术特征摘要】
1.一种基于red/et重组工程的质粒文库构建方法，其特征在于，所述构建方法通过将dna序列集和线性化表达载体的混合物共转化到宿主细胞中完成，其中，dna序列集中每一序列两端均携带与线性化表达载体重组所需的同源序列；从而使每一dna序列均能在宿主细胞内与线性化表达载体经同源重组构建得到环形质粒。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述同源序列的长度为50bp。
3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述宿主细胞为建立有red/et重组工程的细菌宿主细胞，具体的，所述细菌宿主细胞至少能够表达rece和rect。
4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述细菌宿主细胞为大肠杆菌，进一步可以为基因组整合有来源于rac原噬菌体的rece、rect基因的gb2005-dir或其衍生菌株gb2005-dir-pir、gb2005-dir-gyra462。
5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述dna序列集中所有序列两端携带的是相同的同源序列；所述dna序列集中每种序列等量...
【专利技术属性】
技术研发人员：王雪，崔洁，卞小莹，涂强，张友明，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：
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