一种基于纳米抗体NbS和表位SYN的双分子荧光互补系统及其应用技术方案

本发明专利技术涉及蛋白质工程技术领域，公开了一种基于纳米抗体NbS和表位SYN的双分子荧光互补系统及其应用，该系统包括第一载体和第二载体，第一载体包含表位SYN以及荧光蛋白片段G1和G2中的一个；第二载体包含纳米抗体NbS以及荧光蛋白片段G1和G2中的一个；且所述第一载体与所述第二载体中的荧光蛋白片段不同；表位SYN的序列如SEQ ID NO:1所示，纳米抗体NbS的序列如SEQ ID NO:2所示，荧光蛋白片段G1为包含超级折叠GFP蛋白的第1～214位氨基酸的蛋白片段，荧光蛋白片段G2为包含超级折叠GFP蛋白的第215～238位氨基酸的蛋白片段。该系统能够在降低背景信号的条件下提升BiFC的灵敏度，在不依赖于体内现有蛋白质‑蛋白质互作的基础上，完成BiFC并能够将其作为一种工具在体内使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质工程，具体涉及一种基于纳米抗体nbs和表位syn的双分子荧光互补系统及其应用。

技术介绍

1、双分子荧光互补(bifc)是一种基于非侵入性荧光的技术，利用共聚焦激光扫描显微镜便能直接可视化活细胞中蛋白质-蛋白质相互作用的亚细胞定位。理论上，bifc是基于两个无荧光的分裂蛋白结构域上连接的两种蛋白质之间的相互作用，以及在相互作用下两个无荧光的分裂蛋白结构域共同折叠成β桶结构，从而导致荧光团的重构。鉴于分裂荧光蛋白组装的不可逆性，bifc的这种稳定性能够用于捕获瞬时相互作用以及低亲和力复合物。

2、与植物科学中广泛使用的峰移gfp(sgfp或gfp5)和增强型gfp(egfp)相比，超级折叠gfp(sfgfp)表现出更强的折叠能力和成熟效率，以及对氧化环境的抵抗力。在拟南芥原生质体的瞬时表达实验中发现，sfgfp的亮度是sgfp的两倍，同时也比egfp亮25％。进一步的比较分析还表明，基于sfgfp的bifc(split-sfgfp)的荧光强度是五种基于gfp变体的bifc系统中最强的。split-sfgfp系统通常将第十和第十本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于纳米抗体NbS和表位SYN的双分子荧光互补系统，其特征在于，该系统包括第一载体和第二载体，

2.根据权利要求1所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述荧光蛋白片段G1的序列如SEQ ID NO:4所示。

3.根据权利要求1所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述荧光蛋白G2的序列如SEQ ID NO:5所示。

4.根据权利要求1或2所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述第一载体包含依次连接的信号肽SP、荧光蛋白片段G1、蛋白标签HA和表位SYN，所述信号肽SP序列如SEQ IDNO:6所示，蛋白标签HA序列如SEQ ID NO:7所...

【技术特征摘要】

1.一种基于纳米抗体nbs和表位syn的双分子荧光互补系统，其特征在于，该系统包括第一载体和第二载体，

2.根据权利要求1所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述荧光蛋白片段g1的序列如seq id no:4所示。

3.根据权利要求1所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述荧光蛋白g2的序列如seq id no:5所示。

4.根据权利要求1或2所述的双分子荧光互补系统，其特征在于，所述第一载体包含依次连接的信号肽sp、荧光蛋白片段g1、蛋白标签ha和表位syn，所述信号肽sp序列如seq idno:6所示，蛋白标签ha序...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雪雯，邵晓宇，梁泽明，赵笑笛，皮特·普鲁姆，
申请(专利权)人：南方科技大学，
类型：发明
国别省市：