【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开提供了用于处理细胞源性囊泡(cdv)的方法。通过利用离心过滤器，在分析所述cdv的一种或多种特性之前，可以容易地去除过量染色染料或抗体。所述方法提供了快速且简单的处理和分析，同时维持高浓度的cdv。
技术介绍
1、使用外泌体或细胞外囊泡用于各种癌症和其它病状的应用和治疗的研究在继续发展。这些50-150nm细胞源性囊泡递送包含蛋白质、脂质和核酸(包含sirna和反义核酸)的各种货物的能力引起了对利用其递送至各种不同细胞类型的关注。
2、外泌体的一种替代方案是从有核哺乳动物细胞中产生细胞源性囊泡(cdv)。cdv是由有核细胞通过孔径递减的过滤器连续挤出制备的外泌体模拟纳米囊泡。所得cdv在大小、形态和膜的分子组成方面与外泌体表现出许多相似之处，但是所得cdv的产率是外泌体的产率的100倍。cdv也可以由任何有核哺乳动物细胞类型产生，并且可以装载有各种治疗剂并有效地递送到靶细胞和组织。
3、为了从给定细胞群体中分离和分析囊泡，如通过挤出产生的cdv，已经开发了各种方法。然而，这些传统方法通常会导致cdv的损失或...
【技术保护点】
1.一种用于处理细胞源性囊泡(CDV)的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述CDV是通过包括以下的方法获得的：制备有核哺乳动物细胞的悬浮液，以及通过使所述有核细胞顺序地穿过具有递减微米级孔的过滤器来连续地挤出所述有核细胞，以产生包括CDV的生物流体，所述CDV保持与所述有核哺乳动物细胞的膜拓扑结构相同的膜拓扑结构。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述连续挤出包括使所述有核哺乳动物细胞连续穿过孔径为约10μm、约3μm和约0.4μm的膜过滤器。
4.根据权利要求1的权利要求所述的方法，其中所述浓缩包括使所述...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于处理细胞源性囊泡(cdv)的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述cdv是通过包括以下的方法获得的：制备有核哺乳动物细胞的悬浮液，以及通过使所述有核细胞顺序地穿过具有递减微米级孔的过滤器来连续地挤出所述有核细胞，以产生包括cdv的生物流体，所述cdv保持与所述有核哺乳动物细胞的膜拓扑结构相同的膜拓扑结构。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述连续挤出包括使所述有核哺乳动物细胞连续穿过孔径为约10μm、约3μm和约0.4μm的膜过滤器。
4.根据权利要求1的权利要求所述的方法，其中所述浓缩包括使所述生物流体穿过切向流过滤器。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述切向流过滤器的分子量截止值为约300kd至约750kd。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述cdv与荧光染色染料6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(cfse)接触。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述cdv与抗cd9抗体、抗cd63抗体、抗cd81抗体和/或抗igg1抗体接触。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述cdv由以下产生：人胚胎肾(hek)细胞、人高加索结肠腺癌ht29细胞、间充质干细胞(msc)、胚胎干细胞和衍生自胚胎干细胞的细胞、诱导多能干细胞、内皮祖细胞、未成熟和成熟的树突状细胞(dc)、单核细胞、巨噬细胞、t和b淋巴细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞，包含人脐静脉内皮细胞(huvec)，肌细胞、心肌细胞、神经元细胞、神经胶质细胞、肾细胞、胰腺细胞、基质细胞、角质形成细胞或黑素细胞。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述生物流体中的所述cdv的浓度是使用用于纳米颗粒分析的流式细胞仪来确定的。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中在(c)中的所述接触之前，所述cdv的浓度被确定为至少1×1010个cdv/ml。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·佐科，I·帕萨拉夸，S·G·裵，S·W·吴，J·E·朴，SS·朴，HC·刘，
申请(专利权)人：意大利胶囊有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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