CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法技术

本发明专利技术公开了CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，涉及生物繁殖技术领域，S1、供体细胞的选择与处理；S2、卵母细胞的采集；S3、卵母细胞的体外成熟培养，在前成熟处理后，将卵母细胞转移至成熟培养液中继续培养，体外的培养条件为含5%CO2的空气，卵母细胞培养在1‑20小时内的培养温度保持在38.5至39摄氏度中，20‑28小时内的培养温度保持在39至39.5摄氏度；S4、重构胚胎的培养与筛选；S5、受体动物准备与移植；S6、后续监测与管理。本发明专利技术通过在1‑20小时内的培养温度保持在38.5至39摄氏度中，20‑28小时内的培养温度保持在39至39.5摄氏度，精确控制培养温度可以有效激活卵母细胞内的一系列酶和信号通路提高卵母细胞的存活率和发育质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物繁殖，具体是cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法。

技术介绍

1、在牛羊繁殖领域，提高繁殖效率一直是研究者们关注的重点问题。繁殖效率的高低主要取决于卵母细胞的成熟质量、受精率以及后续胚胎发育的潜能等多个关键环节，卵母细胞作为生殖过程的核心要素之一，其成熟质量对整个繁殖过程至关重要。高质量的卵母细胞能够为受精以及胚胎发育提供良好的基础；

2、经检索，中国专利授权公告号cn118956735a公开了一种以放射菌酮为核心的牛羊卵母细胞成熟周期精准优化方法，包括：调控溶液由1-50微克/毫升放射菌酮组成，成熟液由m199培养液与10％体积的血清或牛血清白蛋白，或其它类似替代物组成，成熟液中不含有fsh和lh激素，本专利技术能够有效提高牛羊卵母细胞的成熟率。通过精准地使用放射菌酮作为蛋白质合成抑制剂，在特定浓度范围内对卵母细胞的蛋白质合成进行调控，同时不影响rna的合成，这为卵母细胞的成熟创造了独特的条件，经过预处理和成熟液培养后，通过显微镜观察和染色方法，可以清晰地看到卵母细成熟度的提升，成熟的卵母细胞具备明显特征，如第一极体排本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，在S1、供体细胞的选择与处理中，操作人员应提前一个月对供体进行健康监测，监测频率为一周两次。

3.根据权利要求1所述的CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，在S2、卵母细胞的采集，包括卵巢采集与卵泡采集，所述卵泡采集即卵母细胞采集，使用5mL注射器和12号针头，从直径为2～6mm的卵泡中抽取卵母细胞。

4.根据权利要求3所述的CNP预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，在s1、供体细胞的选择与处理中，操作人员应提前一个月对供体进行健康监测，监测频率为一周两次。

3.根据权利要求1所述的cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，在s2、卵母细胞的采集，包括卵巢采集与卵泡采集，所述卵泡采集即卵母细胞采集，使用5ml注射器和12号针头，从直径为2～6mm的卵泡中抽取卵母细胞。

4.根据权利要求3所述的cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，所述卵巢采集是从屠宰场无菌采集牛羊卵巢，去除多余脂肪组织，用灭菌吸水纸擦，并在25°c至35°c的生理盐水中保存，添加抗生素防止污染。

5.根据权利要求1所述的cnp预处理优化牛羊卵母细胞成熟效果的方法，其特征在于，所述s3、卵母细胞的体外成熟培养中，操作人员使用m199培养基，并添加10%新生犊牛血清（ncs）、1～2mg/l 17β-雌二醇（e2）、10mmol/l hepes、0.12mg/ml丙酮酸钠以及双抗（0.1mg/ml链霉素和0.125 mg/ml青霉素...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓克路，汪立芹，胡伯欣，罗峰，王振国，苑建军，王依然，
申请(专利权)人：上海六骥元支生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：