一种稳转TRPA1离子通道的细胞株及其构建方法和在可降解材料迁出物神经疼痛筛查中的应用技术

本发明专利技术提供一种稳转TRPA1离子通道的细胞株及其构建方法和在可降解材料迁出物神经疼痛筛查中的应用，涉及生物医药技术领域，所述稳转细胞株模型为稳定过表达TRPA1离子通道的细胞，可以长期冻存复苏，且保持高表达状态，有利于进行可降解材料中迁出物的神经疼痛物质的筛选，并给出客观的相对值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及一种稳转trpa1离子通道的细胞株及其构建方法和在可降解材料迁出物神经疼痛筛查中的应用。

技术介绍

1、trpa1(transient receptor potential a1)，又称为anktm1，是一种存在于各种组织和器官中的非选择性阳离子通道（story gm, a trp-like channel expressed innociceptive neurons, is activated by cold temperatures. cell. 2003），它主要表达于感觉神经元中，如肺、皮肤和大脑中的初级感觉神经元，以及肽能神经元，尤其是哺乳动物背根神经节(drg)、三叉神经节(tg)、结节神经节(ng)和颈静脉神经节中的神经元。此外，trpa1也存在于一些非神经元细胞和组织中，包括血管内皮细胞和软骨细胞。trpa1的激活与疼痛调节以及炎症物质的调节密切相关。trpa1还与某些非神经元区域的超敏和过度兴奋有关，并在哮喘、神经病理性疼痛、慢性瘙痒、偏头痛、胃肠运动障碍、焦虑和认知功能障碍的病理生理学中发挥重要作用。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于TRPA1离子通道的用于可降解材料迁出物神经疼痛筛查的稳转细胞株模型，其特征在于，所述的TRPA1离子通道的编码基因通过慢病毒转染整合到宿主细胞染色体上实现稳定过表达。

2.根据权利要求1所述的稳转细胞株模型，其特征在于，所述慢病毒的表达载体包括：pLVX、pLenti Cas9或pCSLenti。

3.根据权利要求1所述的稳转细胞株模型，其特征在于，所述宿主细胞包括：HEK293、SH-SY5Y或HaCaT。

4.权利要求1-3任一项所述的稳转细胞株模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的构建方法，...

【技术特征摘要】

1.一种基于trpa1离子通道的用于可降解材料迁出物神经疼痛筛查的稳转细胞株模型，其特征在于，所述的trpa1离子通道的编码基因通过慢病毒转染整合到宿主细胞染色体上实现稳定过表达。

2.根据权利要求1所述的稳转细胞株模型，其特征在于，所述慢病毒的表达载体包括：plvx、plenti cas9或pcslenti。

3.根据权利要求1所述的稳转细胞株模型，其特征在于，所述宿主细胞包括：hek293、sh-sy5y或hacat。

4.权利要求1-3任一项所述的稳转细胞株模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤（2）中，所述质粒载体同时带有egfp标签及flag标签。

6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤（2）...

【专利技术属性】
技术研发人员：程树军，畅俊壮，薄瑞红，
申请(专利权)人：广州市华代生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：