一种快速鉴定嗜盐四联球菌的筛选方法及其应用技术

本申请提供了一种快速鉴定嗜盐四联球菌的筛选方法及其应用，属于微生物技术领域。本申请实现对嗜盐四联球菌的特异性筛选鉴定，无需对菌株进行基因组提取和上机测序，提升了筛选的效率，降低了筛选成本；基于对生物胺生成关键酶的特异性基因扩增进行不产生物胺菌株的筛选，进一步提升了筛选效率，实现了对工业优良性状嗜盐四联球菌菌株的高效筛选。采用本申请的方法可以同时进行嗜盐四联球菌的鉴定和不产生组胺、酪胺的嗜盐四联球菌的筛选，并实现了高通量检测，有效降低了基因提取、测序的人工成本和时间成本，解决了传统发酵食品性能和质量不稳定性的问题。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及微生物，尤其是一种快速鉴定嗜盐四联球菌的筛选方法及其应用。

技术介绍

1、嗜盐四联球菌是一类广泛存在于酱油，鱼露等发酵产品中具有耐盐，耐高渗透压特性的中度耐盐乳酸菌，其能够有效提高发酵产品质量并缩短发酵周期，是一种重要的发酵菌株。已有研究表明嗜盐四联球菌可以提高发酵产品中有机酸、醛类、酯类、氨基酸等多种风味物质的含量，给酱油，鱼露等调味料提供了柔和丰富的滋味。

2、然而，嗜盐四联球菌的某些菌株会降解特定的氨基酸，如组氨酸、酪氨酸、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸等，氨基酸降解会导致酱油氨基酸指标的减低，从而对酱油的风味口感带来不利影响。尽管这些氨基酸的降解途径尚未完全阐明，但其中一些通过脱羧反应变成了脱羧物质。酱醪的天然发酵环境中含有丰富的乳酸菌组成，既有产生优良性状的菌株也有带来不良代谢物的菌株，因其菌株代谢的不确定性对酱油等发酵产品性能的稳定性造成了影响。而在酱醪体系中人工干预强化具有优良性状的菌株为嗜盐四联球菌，能够抑制不良菌株的生长进而减少不良代谢物的产生。为了获得具有稳定优良特性的发酵产品，防止氨基酸降解等不良代谢物的积累，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.筛选或辅助筛选不生产生物胺的嗜盐四联球菌的引物组，其特征在于，所述引物组包括针对嗜盐四联球菌16S rDNA的特异性引物1、针对组氨酸脱羧酶基因的特异性引物2和针对酪胺脱羧酶基因的特异性引物3；

2.筛选或辅助筛选嗜盐四联球菌的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括如权利要求1所述的引物组。

3.如权利要求2所述的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR反应液。

4.一种筛选或辅助筛选不生产生物胺的嗜盐四联球菌的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤1)包括：取酱醪样品...

【技术特征摘要】

1.筛选或辅助筛选不生产生物胺的嗜盐四联球菌的引物组，其特征在于，所述引物组包括针对嗜盐四联球菌16s rdna的特异性引物1、针对组氨酸脱羧酶基因的特异性引物2和针对酪胺脱羧酶基因的特异性引物3；

2.筛选或辅助筛选嗜盐四联球菌的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括如权利要求1所述的引物组。

3.如权利要求2所述的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括pcr反应液。

4.一种筛选或辅助筛选不生产生物胺的嗜盐四联球菌的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤1)包括：取酱醪样品重悬于无菌水中，得到混合菌液，将混合菌液稀释后，涂布于固体平板上，进行厌氧培养，挑取有透明圈的单克隆菌落，分离纯化，然后将分离纯化后的单克隆菌落重悬于无菌水中，水浴处理，得到待测样品dna...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晨，吴日帮，孙艳萍，周斌，周其洋，
申请(专利权)人：佛山市海天高明调味食品有限公司，
类型：发明
国别省市：