基于XRCC3与XPC基因分析卵巢癌早期筛查方法技术

技术编号:43630982 阅读:22 留言:0更新日期:2024-12-11 15:11
本发明专利技术公开基于XRCC3与XPC基因分析卵巢癌早期筛查方法,在通过识别基因多态性为卵巢癌的早期诊断提供新的生物标志物,该方法包括从临床卵巢癌患者和对照组收集外周血样本,提取全基因组DNA并进行纯化,随后,利用22K Human Genome Array芯片进行基因杂交,分析XRCC3和XPC基因的特定多态性位点,经过扩增、片段化和杂交后,使用激光扫描仪获取高分辨率的荧光图像,并通过图像分析软件评估基因表达差异,最终,通过RT‑PCR技术验证显著差异基因,通过XRCC3和XPC基因的特定多态性位点,有助于早期诊断卵巢癌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及xxxxx,特别是涉及基于xrcc3与xpc基因分析卵巢癌早期筛查方法。


技术介绍

1、卵巢癌是女性生殖系统中最具致命性的恶性肿瘤之一,早期诊断对提高患者生存率至关重要,研究表明,dna修复机制的异常与多种癌症的发展密切相关,尤其是卵巢癌,xrcc3和xpc基因在dna修复中发挥关键作用,其中xrcc3参与同源重组修复,而xpc则在核苷酸切除修复中发挥重要作用,两者的基因多态性可能影响个体对dna损伤的修复能力,从而增加患卵巢癌的风险;

2、近年来,研究表明dna修复机制在卵巢癌的发生与发展中发挥着重要作用;dna修复基因如xrcc3和xpc在修复dna损伤中具有关键功能,涉及细胞对环境因素和内源性损伤的反应;xrcc3基因编码的蛋白质主要参与同源重组修复,负责修复双链dna断裂;而xpc基因编码的蛋白质则在核苷酸切除修复中发挥作用,负责识别并修复因紫外线和化学物质引起的dna损伤;

3、这些基因的多态性可能导致修复能力的变化,从而影响个体对癌症的易感性;例如,xrcc3基因的某些单核苷酸多态性(snp)已被证实与卵巢本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于XRCC3与XPC基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的基于XRCC3与XPC基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,所述步骤三中,所述mRNA的逆转录反应采用CbcScript逆转录酶,以保证逆转录效率和cDNA的完整性,通过将从实验组-临床卵巢癌患者和对照组-其他良性疾病就诊患者收集的mRNA混合,并根据CbcScript逆转录酶的用户手册中提供的反应条件设置,包括适宜的温度和时间,在反应完成后,利用琼脂糖凝胶电泳法确认cDNA的质量,通过比较cDNA的条带大小与标准标记,以验证完整性。

3.根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.基于xrcc3与xpc基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的基于xrcc3与xpc基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,所述步骤三中,所述mrna的逆转录反应采用cbcscript逆转录酶,以保证逆转录效率和cdna的完整性,通过将从实验组-临床卵巢癌患者和对照组-其他良性疾病就诊患者收集的mrna混合,并根据cbcscript逆转录酶的用户手册中提供的反应条件设置,包括适宜的温度和时间,在反应完成后,利用琼脂糖凝胶电泳法确认cdna的质量,通过比较cdna的条带大小与标准标记,以验证完整性。

3.根据权利要求1所述的基于xrcc3与xpc基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,所述步骤四中,加入全基因组扩增试剂的浓度范围为1-5μl,并保持反应体系的体积在20-50μl,在扩增过程中采用热循环程序,包括以下阶段:

4.根据权利要求1所述的基于xrcc3与xpc基因分析卵巢癌早期筛查方法,其特征在于,所述步骤五中,片段化后的dna样本需经过酶解处理,其酶的选择包括限制性内切酶或dna片段化酶,生成的dna片段在200-500bp范围内,在dna沉淀后,通过离心和洗涤去除未结合的试剂和酶,得到高纯度的片段化dna样本,并重悬于适当的杂交缓冲液中。

5.根据权利要求1所述的基于xrcc3...

【专利技术属性】
技术研发人员:白延霞赵成胡艳霍丹闫莉
申请(专利权)人:陕西省肿瘤医院陕西省肿瘤防治研究所陕西省第三人民医院
类型:发明
国别省市:

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