用于降解呕吐毒素的双功能酶及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于降解呕吐毒素的双功能酶及其应用。首次揭示一种呕吐毒素降解双功能酶，其能够有效地表达且能形成正确的空间蛋白结构，具有良好的生物活性，能将DON转化3‑keto‑DON，并进一步降解为几乎无毒性的3‑epi‑DON。本发明专利技术的双功能蛋白的制备简单，高效且生产成本低廉，适用于大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和酶工程；更具体地，本专利技术涉及一种降解呕吐毒素的双功能酶、其制备方法以及其在将呕吐毒素降解为几乎无毒的异构形式的应用。

技术介绍

1、真菌毒素(mycotoxin)是真菌在一定条件下产生的有毒次级代谢产物，对植物、动物和人都可产生危害。主要由曲霉属、镰刀菌属、青霉属、链格孢属和棒状菌属等产生。目前已报道的真菌毒素约有400种，主要包括黄曲霉毒素、镰刀菌素、展青霉素、链格孢属毒素、伏马毒素等。据联合国粮农组织发布，全世界生产的谷物中约有25％受到真菌毒素污染。

2、呕吐毒素(deoxynivalenol，don)是一种四环环氧倍半萜，属于b型单端孢霉烯族化合物。呕吐毒素对人和动物的健康都有威胁，能引起人和动物肠胃不适、呕吐、头晕、头痛、腹痛及腹泻等。不仅如此，还会损害人和动物的免疫和生殖功能。联合国粮农组织及世界卫生组织已经将don确定为最危险的自然发生的食品污染物之一。根据gakrb2761-2017，食品中呕吐毒素限量标准为1000μg/kg。有研究表明，呕吐毒素在谷物及其制品中污染比较常见。在部分地区作为饲料原料的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种降解呕吐毒素的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(a)所述双功能酶从氨基端到羧基端依次包含：所述脱氢酶片段，所述醛酮还原酶片段；较佳地，两者之间以连接肽连接；或

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，(a)中，所述脱氢酶片段的氨基酸序列如SEQID NO:8中第1位及第8～592位所示；所述醛酮还原酶片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:8中第615～897位所示；较佳地，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:7中第593～614位所示；或

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述双功能酶...

【技术特征摘要】

1.一种降解呕吐毒素的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，(a)所述双功能酶从氨基端到羧基端依次包含：所述脱氢酶片段，所述醛酮还原酶片段；较佳地，两者之间以连接肽连接；或

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，(a)中，所述脱氢酶片段的氨基酸序列如seqid no:8中第1位及第8～592位所示；所述醛酮还原酶片段的氨基酸序列如seq id no:8中第615～897位所示；较佳地，所述连接肽的氨基酸序列如seq id no:7中第593～614位所示；或

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述双功能酶的氨基酸序列如seq idno:8或seq id no:6所示；

5.具有协同作用的双功能酶，包含相互连接的以下的蛋白：一脱氢酶片段，一醛酮还原酶片段，两者操作性连接。

6.如权利要求5所述的具有协同作用的双功能酶，其特征在于，(a)所述双功能酶从氨基端到羧基端依次包含：所述脱氢酶片段，所述醛酮还原酶片段；较佳地，两者之间以连接肽连接；或

7.如权利要求6所述的具有协同作用的双功能酶，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：武爱波，郭明珠，余佃贞，孙姝婷，刘美辰，
申请(专利权)人：中国科学院上海营养与健康研究所，
类型：发明
国别省市：