调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因、制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因、制备方法及其应用，基因为miR308‑p3或PGRP‑LB，通过PCR扩增获得。同时提供了过表达或抑制miR308‑p3的制备方法以及干扰基因PGRP‑LB表达的dsRNA的制备方法。小菜蛾3龄幼虫注射PGRP‑LB基因的dsRNA后，PGRP‑LB基因的转录水平大幅减少。经蝉拟青霉侵染后小菜蛾存活率显著降低。将miR308‑p3的模拟物或抑制剂分别注射到小菜蛾的3龄幼虫后，PGRP‑LB的表达水平分别显著降低或升高，miR308‑p3能够负调控PGRP‑LB的表达。过表达miR308‑p3和抑制miR308‑p3的表达后的小菜蛾在蝉拟青霉侵染后存活率分别显著降低和升高。表明基因miR308‑p3通过负调控PGRP‑LB的表达进而参与到小菜蛾对蝉拟青霉侵染的免疫反应，这两个基因可应用到害虫防治中，能有效提高真菌杀虫剂防治效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因、制备方法及其应用。

技术介绍

1、小菜蛾(plutella xylostella)属于鳞翅目害虫，主要为害甘蓝、芥菜、油菜等十字花科作物。其生长周期短、繁殖能力强、世代重叠现象严重，在我国绝大部分蔬菜种植区都有分布，每年对我国都能造成巨大的经济损失。农药对小菜蛾的防效良好，但长期大量、不合理的使用，使小菜蛾对多种农药产生抗药性，使化学防治工作难以有效开展。此外人们日益注重饮食健康，对蔬菜的安全性要求也愈高，因此对小菜蛾生物防治的关注越来越多。由于昆虫病原真菌资源丰富，对害虫防治效果好，且对环境友好安全，因此真菌杀虫剂成为不可或缺的生物防治资源。

2、蝉拟青霉(isaria cicadae)是在鳞翅目幼虫和同翅目昆虫幼虫上发现的病原真菌。病原真菌具有感染和杀死昆虫的能力。它们附着在昆虫的表皮上，穿透身体，吸收宿主的营养物质，并最终杀死昆虫。然而生产实践中病原真菌存在诸如杀虫速度慢、防治效果不稳定、杀虫效果易受环境影响等问题。如何提高真菌杀虫剂的杀虫速度和防治效果是当前真菌杀虫剂存在的亟本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因PGRP-LB，其特征在于，所述基因PGRP-LB的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因miR308-p3，其特征在于，所述基因miR308-p3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.如权利要求2所述的调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因miR308-p3，其特征在于，所述基因miR308-p3负调控基因PGRP-LB的表达。

4.一种调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因PGRP-LB的制备方法，其特征在于，以合成的小菜蛾幼虫cDNA为模板，利用引物进行PCR扩增，胶回收P...

【技术特征摘要】

1.调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因pgrp-lb，其特征在于，所述基因pgrp-lb的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因mir308-p3，其特征在于，所述基因mir308-p3的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.如权利要求2所述的调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因mir308-p3，其特征在于，所述基因mir308-p3负调控基因pgrp-lb的表达。

4.一种调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因pgrp-lb的制备方法，其特征在于，以合成的小菜蛾幼虫cdna为模板，利用引物进行pcr扩增，胶回收pcr产物制备基因pgrp-lb。

5.一种干扰基因pgrp-lb的dsrna的制备方法，其特征在于，以合成的小菜蛾...

【专利技术属性】
技术研发人员：宛婧琪，党向利，邢悦，周泳利，陆莹，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：