circRNA在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用制造技术

circRNA在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，它涉及分子遗传学领域，本发明专利技术circRNA在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，circRNA为Circ‑21490，Circ‑21490的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。本发明专利技术成功克隆、鉴定了一个新的circRNA序列——Circ‑21490，通过分子生物学方法确定了Circ‑21490是猪骨骼肌卫星细胞增殖的标志物，过表达Circ‑21490能够促进猪骨骼肌卫星细胞增殖。设计了含有Circ‑21490特异引物对的检测试剂盒，利用该试剂盒分析Circ‑21490的表达水平，从而鉴定猪骨骼肌卫星细胞的增殖潜能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子遗传学领域，具体涉及一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的标志物circ-21490及其应用。

技术介绍

1、猪肉是人类饮食的重要组成部分，在我国居民的饮食结构中，猪肉占肉类消费总量的40％左右。骨骼肌的生长、发育直接决定着生猪的产肉量、瘦肉率。骨骼肌主要由肌纤维和周围的肌内结缔组织组成。骨骼肌卫星细胞位于骨骼肌肌膜与基底膜之间，是一类具有自我更新能力的肌源性干细胞，具有分化为成肌细胞的潜能。通常情况下，骨骼肌卫星细胞出于静息状态，受到刺激时会被激活从而进入增殖和分化过程，以帮助肌肉组织修复、恢复正常组织结构，在出生后的骨骼肌发育、再生和稳态中起关键作用。骨骼肌卫星细胞增殖受到一系列转录因子、非编码rna的协同调控。

2、环状rna(circular rna,circrna)是近期发现的一种重要的非编码rna，单链、闭合、环状结构，是真核生物前体mrna反向剪接的产物，在基因表达调控、细胞信号传导、生物学过程调节等方面具有重要作用。circrna的功能主要体现在以下几个方面：(1)作为分子海绵吸收mirna，抑制mirna对靶基因的调控；(2)调节亲本基因的转录，影响亲本基因的转录水平；(3)能够与蛋白质发生相互作用，调节蛋白质的功能和定位；(4)参与形成调控复合物，影响mrna的稳定性和蛋白质合成；(5)有些circrna能够翻译生成肽链。随着研究的深入，广大科研工作者逐渐认识到了circrna在生命科学中的重要性，但目前有关研究主要集中在人类医学领域及小鼠等模式动物上，猪骨骼肌发育相关的circrna研究较少，鉴定调控猪肌肉发育的重要circrna，有助于揭示猪肌肉生成的机制，促进猪分子育种进程。

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术对民猪肌肉组织进行了全转录组测序，分析circrna在肌肉组织中的表达特征，发现了一种新的circrna——circ-21490，并且其在不同发育时期的背最长肌中差异表达，表明circ-21490可能在肌肉发育中发挥重要作用。因此，对circ-21490进行了深入研究，确定了其与骨骼肌卫星细胞增殖的关系。

2、本专利技术的circrna在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，所述的circrna为circ-21490，circ-21490的核苷酸序列如seq id no:1所示。

3、进一步地，所述猪骨骼肌卫星细胞为民猪骨骼肌卫星细胞。

4、含有检测本专利技术circrna标志物的特异性引物对的试剂盒。

5、进一步地，所述的试剂盒用于检测circ-21490表达水平。

6、进一步地，包括如seq id no:2所示的上游引物和seq id no:3所示的下游引物。

7、进一步地，所述的用于检测circ-21490表达水平是检测猪骨骼肌卫星细胞中circ-21490的相对表达水平，若表达水平升高，则表明猪骨骼肌卫星细胞增殖能力强。

8、本专利技术提供了一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的标志物circ-21490及其应用。本专利技术成功克隆、鉴定了一个新的circrna序列——circ-21490，通过分子生物学方法确定了circ-21490是猪骨骼肌卫星细胞增殖的标志物，过表达circ-21490能够促进猪骨骼肌卫星细胞增殖。设计了含有circ-21490特异引物对的检测试剂盒，利用该试剂盒分析circ-21490的表达水平，从而鉴定猪骨骼肌卫星细胞的增殖潜能。

9、本专利技术包含以下有益效果：

10、(1)在民猪肌肉组织中克隆、鉴定了一个新的circrna——circ-21490，发现其主要定位于细胞质，可能作为cerna吸收mirna发挥调控作用。

11、(2)circ-21490促进猪骨骼肌卫星细胞增殖。

12、(3)circ-21490可以作为猪骨骼肌卫星细胞增殖能力的标记物。

13、(4)circ-21490的表达水平可以鉴定细胞增殖能力。

14、(4)提供了一种检测猪骨骼肌卫星细胞增殖能力的试剂盒。

15、(5)提供了一种促进猪骨骼肌卫星细胞增殖的方法。

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【技术保护点】

1.circRNA在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，其特征在于所述的circRNA为Circ-21490，Circ-21490的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。

2.权利要求1所述的circRNA在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，其特征在于，所述猪骨骼肌卫星细胞为民猪骨骼肌卫星细胞。

3.含有检测权利要求1所述的circRNA标志物的特异性引物对的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒用于检测Circ-21490表达水平。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，包括如SEQ ID No:2所示的上游引物和SEQ ID No:3所示的下游引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的用于检测Circ-21490表达水平是检测猪骨骼肌卫星细胞中Circ-21490的相对表达水平，若表达水平升高，则表明猪骨骼肌卫星细胞增殖能力强。

【技术特征摘要】

1.circrna在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，其特征在于所述的circrna为circ-21490，circ-21490的核苷酸序列如seq id no:1所示。

2.权利要求1所述的circrna在猪骨骼肌卫星细胞增殖中的应用，其特征在于，所述猪骨骼肌卫星细胞为民猪骨骼肌卫星细胞。

3.含有检测权利要求1所述的circrna标志物的特异性引物对的试剂盒。

4.根据权利要求3所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘娣，张冬杰，何鑫淼，王文涛，冯艳忠，陈赫书，刘自广，何海娟，李忠秋，吴赛辉，李淼，汪亮，杨秀芹，
申请(专利权)人：黑龙江省农业科学院畜牧研究所，
类型：发明
国别省市：