大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶、其生产方法、包含其的药物组合物及试剂盒、利用其治疗血栓栓塞相关疾病的方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶(E‑μPlm)及其生产方法、一种药物组合物及其包含所述药物组合物的试剂盒、所述药物组合物及所述试剂盒在治疗血栓栓塞相关疾病中的应用以及一种通过使用所述药物组合物及所述试剂盒来治疗血栓栓塞相关疾病的方法。E‑μPlm或E‑μPlg的酶原版本是不稳定的，可以进行自动激活。此外，E‑μPlm的体内半衰期明显短于酵母表达的微纤溶酶(Y‑μPlm)，这使得所述E‑μPlm、所述药物组合物和所述试剂盒在治疗血栓栓塞性疾病方面有效但出血副作用减少。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本申请涉及重组蛋白，更具体地涉及一种大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶、其生产方法、及其药物组合物和包含其试剂盒，以及通过使用所述药物组合物和所述试剂盒来治疗血栓栓塞相关疾病的应用和方法。

技术介绍

1、根据美国心脏协会的数据，尽管covid-19大流行对健康造成了巨大影响，但心血管疾病仍然是全球死亡的主要原因。维持心血管系统健康的关键是保持止血平衡，一旦发生致病性血栓栓塞，破坏止血平衡可导致重大致命性疾病，如缺血性中风、心肌梗死、肺栓塞、外周动脉闭塞、深静脉血栓形成、以及血栓栓塞引起的其他疾病。病理性血栓(血块)在体内被纤溶酶(plm)溶解成可溶性成分，这是一种源自纤溶酶原(plg)的丝氨酸蛋白酶。plg通过与纤维蛋白和纤维蛋白原两者结合而形成凝块。plg可通过组织型plm激活因子(tpa)和尿激酶型plm激活因子(upa)两者转化为plm，这两种因子是体内特异性plg激活因子。plg激活因子已发展成为援引治疗血栓栓塞性疾病的溶栓药物。目前，在美国，唯一被证实的治疗急性缺血性中风的药物是tpa。然而，众所周知，tpa不是“理想的溶栓药物”，原因如下：首先，3本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，通过丙氨酸扫描诱变方法单独改变人体微纤溶酶中与α2-抗纤溶酶接触的催化结构域的表面残基从而使所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶能够溶解引起疾病的血栓同时避免α2-抗纤溶酶抑制和出血副作用。

2.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶中通过所述丙氨酸扫描诱变方法改变的所述催化结构域的所述表面残基分别显示环1-6，其中

3.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶突变后通过所述催化结构域的所述表面残基分别标记为：Gly739Ala、...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，通过丙氨酸扫描诱变方法单独改变人体微纤溶酶中与α2-抗纤溶酶接触的催化结构域的表面残基从而使所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶能够溶解引起疾病的血栓同时避免α2-抗纤溶酶抑制和出血副作用。

2.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶中通过所述丙氨酸扫描诱变方法改变的所述催化结构域的所述表面残基分别显示环1-6，其中

3.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶突变后通过所述催化结构域的所述表面残基分别标记为：gly739ala、arg582ala、met585ala、lys607ala、phe587ala、ser608ala、arg610ala、glu641ala、pro642ala。

4.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶的微纤溶酶原在ph6.5左右自动激活。

5.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中所述大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶的体内半衰期约为14.3±1.6分钟至约28.5±1.1分钟。

6.根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶，其中所述重组人体微纤溶酶被选择为对切割和使致病性多肽或不溶性纤维蛋白脱毒具有生物活性，并且对α2-抗纤溶酶抑制具有抗性。

7.一种生产根据权利要求1所述的大肠杆菌表达的重组人体微纤溶酶的方法，包括以下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔺新力，吴云东，陆正昌，
申请(专利权)人：深圳湾实验室，
类型：发明
国别省市：