【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及杂交瘤单抗制备，尤其涉及一种杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子及应用。
技术介绍
1、在杂交瘤单抗制备过程中，刚刚融合的细胞和克隆化的细胞都比较难以生长，因此需要添加饲养层细胞才能较快地生长。饲养细胞释放生长刺激因子，为杂交瘤细胞提供必要的生长条件，同时饲养细胞也可满足新生杂交瘤细胞对细胞密度的依赖性。
2、目前饲养层细胞来源有以下几种。
3、1)腹腔巨噬细胞：不仅可以作为饲养层，而且它还可以吞噬掉死亡的细胞碎片，起到环境清理的作用。其制备方法是：将小鼠断颈处死，浸泡在75％酒精5分钟以上，取出小鼠置于解剖板上，用大头针固定好四肢，在超净工作台上用一把镊子挑起腹部皮肤，用手术剪剪开腹部皮肤，换干净的镊子夹住腹部，用另一把镊子夹住腹膜，用干净的注射器像腹部注射不完全培养基，吹打几次，吸出的培养基即含有腹腔巨噬细胞，计数后稀释备用。
4、2)脾脏细胞：脾脏细胞与杂交瘤细胞具有很高的同源性，与杂交瘤的兼容性较好，是作为饲养层很好的选择，其制备方法与腹腔巨噬细胞类似：...
【技术保护点】
1.一种杂交瘤细胞饲养层替代物Hybridoma Feeder添加因子，其特征在于，该杂交瘤细胞饲养层替代物Hybridoma Feeder添加因子的配方为：在体积百分比为90％的DMEM培养基，以及体积百分比为10％的胎牛血清的混合液体中，含有浓度为1mM的草酰乙酸，浓度为1mM的丙酮酸钠，浓度为0.1-0.5ug/mL的胰岛素，浓度为0.5-2ng/mL的人白介素-6，浓度为5-15ng/mL佛波酯，浓度为1-5ug/mL的LPS脂多糖，浓度为10-30ug/mL的肽聚葡糖，和浓度为BlyS/BAFF的0.1-2ng/mL。
2.根据权利要求1所述的杂...
【技术特征摘要】
1.一种杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子，其特征在于，该杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子的配方为：在体积百分比为90％的dmem培养基，以及体积百分比为10％的胎牛血清的混合液体中，含有浓度为1mm的草酰乙酸，浓度为1mm的丙酮酸钠，浓度为0.1-0.5ug/ml的胰岛素，浓度为0.5-2ng/ml的人白介素-6，浓度为5-15ng/ml佛波酯，浓度为1-5ug/ml的lps脂多糖，浓度为10-30ug/ml的肽聚葡糖，和浓度为blys/baff的0.1-2ng/ml。
2.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子，其特征在于，该杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子的配方为：在体积百分比为90％的dmem培养基，以及体积百分比为10％的胎牛血清的混合液体中，含有浓度为1mm的草酰乙酸，浓度为1mm的丙酮酸钠，浓度为0.1ug/ml的胰岛素，浓度为0.5ng/ml的人白介素-6，浓度为5ng/ml佛波酯，浓度为1ug/ml的lps脂多糖，浓度为10ug/ml的肽聚葡糖，浓度为blys/baff的0.1ng/ml。
3.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子，其特征在于，该杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子的配方为：在体积百分比为90％的dmem培养基，以及体积百分比为10％的胎牛血清的混合液体中，含有浓度为1mm的草酰乙酸，浓度为1mm的丙酮酸钠，浓度为0.2ug/ml的胰岛素，浓度为1ng/ml的人白介素-6，浓度为10ng/ml佛波酯，浓度为2ug/ml的lps脂多糖，浓度为20ug/ml的肽聚葡糖，浓度为blys/baff的0.5ng/ml。
4.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞饲养层替代物hybridoma feeder添加因子，其特征在于，该杂交...
【专利技术属性】
技术研发人员：许行尚，朱道云，王星强，
申请(专利权)人：江苏华控生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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