一种采用猪瘟病毒可溶性蛋白作为包被抗原的ELISA抗体检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种采用猪瘟病毒可溶性蛋白作为包被抗原的ELISA抗体检测方法及其应用，属于生物技术领域。本发明专利技术直接从猪瘟病毒中提取猪瘟病毒可溶性蛋白，再经中空纤维过滤、凝胶层析、阴、阳离子交换层析得到精纯的病毒液，然后加入SDS溶液、乙醇煮沸，再透析、离心取上清得到猪瘟病毒可溶性蛋白；所述猪瘟病毒可溶性蛋白既包括了容易变异的免疫原蛋白又包括了不容易变异的结构蛋白，可作为包被抗原用于猪瘟病毒的ELISA抗体检测，使抗体检测结果更能反映出疫苗免疫后的抗体变化趋势，能有效监测猪瘟病毒的感染情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种采用猪瘟病毒可溶性蛋白作为包被抗原的elisa抗体检测方法及其应用。

技术介绍

1、猪瘟是由猪瘟病毒引起的、发生在猪上的一种高度急性、热性、接触性传染病。猪瘟病毒可以分为经典猪瘟病毒(classical swine fever virus，csfv)和非洲猪瘟病毒(african swine fever virus，asfv)。其中，经典猪瘟病毒是ssrna病毒，黄病毒科瘟病毒属，其rna为单股正链，病毒粒子呈圆形，大小为38～44nm，核衣壳是立体对称二十面体，有包膜；非洲猪瘟病毒是dsdna病毒，非洲猪瘟科非洲猪瘟病毒属，病毒粒子直径约为200nm左右，20面体，呈现六边型，立体对称，有囊膜和内膜。猪瘟流行广泛，发病率、死亡率高，其主要传播途径为消化道和呼吸道，且母猪感染后，经胎盘垂直感染胎儿，该病一年四季流行，可对养猪业造成毁灭性的打击，是危害养猪业最严重的传染病之一。

2、目前，疫苗接种是控制猪瘟的重要手段，包括灭活疫苗和弱毒疫苗，然而在生产实践中，仍然会存在疫苗接种后不能抵御猪瘟病毒侵袭的现象，这是因为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤S2中，将所述猪瘟病毒加入0.1M且pH 7.4的PBS溶液，然后用孔径为30-150K的中空纤维过滤。

3.根据权利要求1所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述分子筛柱平衡液为0.1M PB溶液，柱体高为20-100cm。

4.根据权利要求3所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述平衡液的用量为3-5个分子筛柱体积。

5.根据权利要求1所述的...

【技术特征摘要】

1.一种纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤s2中，将所述猪瘟病毒加入0.1m且ph 7.4的pbs溶液，然后用孔径为30-150k的中空纤维过滤。

3.根据权利要求1所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤s2中，所述分子筛柱平衡液为0.1m pb溶液，柱体高为20-100cm。

4.根据权利要求3所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤s2中，所述平衡液的用量为3-5个分子筛柱体积。

5.根据权利要求1所述的纯化猪瘟病毒可溶性蛋白的方法，其特征在于，在步骤s2中，所述阴离子填料的添加量按每50ml猪瘟病毒液添加0.5-2g。

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【专利技术属性】
技术研发人员：韦明邦，张辉，谭占坤，段梦琪，李英，卓曲，商鹏，强巴央宗，
申请(专利权)人：西藏农牧学院，
类型：发明
国别省市：