芋螺毒素融合蛋白MGS-AFP3(R509Y)及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种芋螺毒素融合蛋白MGS‑AFP3(R509Y)及其制备方法和应用，属于生物技术领域，涉及基因工程及蛋白质工程。将芋螺毒素MGS基因和AFP3(人类甲胎蛋白第3个结构域)基因突变体(R108Y)连接，把连接好的芋螺毒素融合蛋白MGS‑AFP3(R108Y)基因插入到表达载体中，然后把构建的载体转染芋螺细胞,促使芋螺细胞高效分泌表达芋螺毒素融合蛋白到培养基中，再通过浓缩纯化培养基获得芋螺毒素融合蛋白MGS‑AFP3(R108Y)。本发明专利技术在芋螺细胞中获得芋螺毒素融合蛋白MGS‑AFP3(R509Y)活性较好，纯度较高，该方法表达的蛋白可以应用于肺癌的治疗研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及基因工程及蛋白质工程，尤其涉及一种通过芋螺细胞获得的芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)及其制备方法和应用。

技术介绍

1、肺类肝腺癌(hal)是一种罕见的癌症，患者表达甲胎蛋白及烟碱型乙酰胆碱受体促进癌症发展。申请人研究发现芋螺毒素mgs可以抑制烟碱型乙酰胆碱受体的活性。而afp3(r509y)(甲胎蛋白第3结构域突变体)，它可以竞争抑制甲胎蛋白的活性。为了设计抗癌药物用于治疗hal，将芋螺毒素mgs与afp3(r509y)融合表达。这种芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)可以同时抑制烟碱型乙酰胆碱受体及甲胎蛋白的活性。申请人研究数据表明：该融合蛋白mgs-afp3(r509y)可以在芋螺细胞中高度表达。融合蛋白mgs-afp3(r509y)可以抑制肺癌细胞生长，尤其是抑制过表达甲胎蛋白的肺癌细胞的生长。

2、目前，经检索尚未见有关利用芋螺细胞获得芋螺毒素融合蛋mgs-afp3(r509y)方法的报道。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供了一种芋本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.芋螺毒素MGS基因在制备芋螺毒素融合蛋白MGS-AFP3(R509Y)上的应用，其特征在于，所述芋螺毒素MGS基因序列为：atgggctgct gccccaaccc cagctgcagg cagaaccaccccgagctgtg cagcaaccag。

2.编码芋螺毒素融合蛋白MGS-AFP3(R509Y)的基因，其特征在于，基因序列如SEQ IDNO:1所示。

3.编码芋螺毒素融合蛋白MGS-AFP3(R509Y)的基因的合成方法，其特征在于，步骤如下：把芋螺毒素MGS基因(atgggctgct gccccaaccc cagctgcagg cagaaccac...

【技术特征摘要】

1.芋螺毒素mgs基因在制备芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)上的应用，其特征在于，所述芋螺毒素mgs基因序列为：atgggctgct gccccaaccc cagctgcagg cagaaccaccccgagctgtg cagcaaccag。

2.编码芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)的基因，其特征在于，基因序列如seq idno:1所示。

3.编码芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)的基因的合成方法，其特征在于，步骤如下：把芋螺毒素mgs基因(atgggctgct gccccaaccc cagctgcagg cagaaccacc ccgagctgtgcagcaaccag)及afp3突变体(r509y)基因(gen bank:nm_001134的第3个结构域，第401～610个残基，其中509r突变为y)连接，c端加上6个组氨酸序列。

4.一种表达载体，其特征在于，包括权利要求2所述的核酸分子。

5.芋螺细胞中获得芋螺毒素融合蛋白mgs-afp3(r509y)的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：林波，张露潆，陈小兵，刘坤，李伟，鲁琰，董栩，陈栘，朱明月，李孟森，
申请(专利权)人：海南医科大学海南省医学科学院，
类型：发明
国别省市：