鸡败血支原体调配物,鸡败血支原体K5054菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种可预防鸡形目禽类中恶性鸡败血支原体感染的预防性调配物。该调配物包括一预防量的活ＭＧ菌株Ｋ５０５４或其衍生菌株于一医药上可接受的载剂中。本发明专利技术还提供了一种可预防鸡形目禽类中恶性鸡败血支原体感染的疫苗，并提供了投与此调配物及疫苗的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
,鸡败血支原体k5054菌株及其应用的制作方法专利技术
技术介绍
领域本专利技术概言之涉及家禽防护，具体而言涉及一种鸡败血支原体(MG)预防性调配物。
技术介绍
鸡败血支原体是一种禽呼吸道病原菌，属于软件纲、鸡形目及支原体科。在某些情况下，MG可在鸡及火鸡(尤其是幼禽)中引起急性呼吸道疾病，其中火鸡更易于感染。MG亦可在猎鸟中引起上呼吸道疾病。感染早期的水肿病变表明，一免疫病理学反应可能会引起某些观察到的病理现象。最近，人们已将其认为是导致北美洲家养雀科禽类中的结膜炎的一个原因。该种疾病的严重程度在很大程度上受病毒(例如，鸡新城疫病毒、传染性支气管炎及/或诸如埃希氏大肠杆菌的细菌)继发感染程度的影响。此种疾病可能会出现较慢性形式且会导致种鸡及蛋鸡的产蛋量下降。此感染在纵向上通过受到感染的蛋传播，在横向上通过密切接触传播。其它传播方法较少有记载。可以两种途径来检测MG。通过在不含细胞的介质中分离生物体或通过直接检测受到感染的组织或拭子样品中的DNA即可判断MG的存在。若所得结果不明确，则可将可疑材料接种鸡胚或鸡。通过检验生物体或其DNA或通过检测特异性体液抗体即可作出感染诊断。用于分离的样品由渗出物或稀释的组织匀浆、组织或器官的拭子组成。培养物亦可取自眼框下窦道呼吸物或关节腔或取自蛋黄或胚胎。所选样品将会受到临床症状或任何存在疾患的影响。使用肉汤培养基及琼脂进行分离，但在进行鉴别之前通常需要在琼脂上获得支原体菌落。如果存在困难，则首先通过无支原体的鸡胚或无支原体的鸡对所述材料进行传代可能会有所帮助。尽管某些基本的生化试验可能有助于对支原体分离物进行初步分类，但最终的鉴别必须通过血清学检验或DNA检验来进行。其中最令人满意的是PCR、荧光抗体试验及免疫过氧化酶试验。DNA检测方法主要基于聚合酶链反应，其已应用于专业化的实验室中。商品化试剂盒已进入多个国家的市场，且可用来检测野外菌株及用来将其与F疫苗菌株区别开来。多种血清学检验已经用于检测MG抗体，但这些检验在一定程度上对所有MG抗体皆缺乏专一性及敏感性，且其在禽类筛选方面较各禽类的试验方面更令人满意。最常用的是快速血清凝集(RSA)试验、酶联免疫吸附分析(ELISA)及血凝抑制(HI)试验。在RSA试验中，使用工业生产的染色MG抗原对各禽类的血清进行凝集试验。对与此抗原在2分钟内产生凝集反应的鸡或火鸡血清应在56℃下加热30分钟并重新进行试验。仍然发生反应的血清(尤其当稀释后)被视为阳性。然后，可通过ELISA或HI试验对此等血清进行鉴定。由于鸡败血支原体(MG)可在鸡及火鸡中导致慢性呼吸道疾病，因此会造成重大经济损失、使肉食鸡的肉质降低并导致蛋鸡的产蛋量下降。可导致重大经济后果的散发性蔓延发生于火鸡或肉用仔鸡中，且此会使成批饲养的蛋鸡中持续存在花费巨大的地区性动物感染。不过，较佳的MG控制方法是保持禽类中无MG，因此，已使用活性疫苗及灭活疫苗二者来达此目的。原则上，疫苗可分为两类，即活性(减毒)疫苗及灭活疫苗。活性疫苗的优点包括可以一感染性药剂的自然形式将此药剂的所有相关免疫原性决定因子提供至接种者免疫系统，以及由于免疫药剂本身具有可在接种者体内增多的特性，故仅需较少量的免疫药剂。活性疫苗的一个主要缺点是其安全性因素一活性疫苗可在免疫低下的动物中引发疾病，或此活性微生物甚至可恢复毒性并由此使动物遭受恶性感染。灭活疫苗中则未显示出上述安全性方面的缺点，因而这一点成为其优于活性疫苗的一主要优点。然而，灭活疫苗的一主要缺点是其本身的免疫原性较低，即，灭活的免疫原由此对于触发接种者的免疫系统而言仅具有有限的能力。因此，需要适宜的手段来增强这些灭活免疫原的免疫原性。此类型的疫苗通常需要具有显著免疫刺激能力的佐剂以达到预防疾病所需的最低能力。因此，显然需要与灭活免疫原一起使用的额外免疫刺激剂以增强这些免疫原本身较低的免疫原性，尤其需要适用于一种以上免疫原的免疫刺激剂。奇怪的是，人们尚未认识到可将MG疫苗广泛用于家禽中。MG疫苗通常用于多年蛋鸡饲养场所的鸡群中以防止由野生型菌株造成的产蛋量下降。这是很重要的，因为一旦一群体中存在MG感染，则此感染会一直持续存在。最近，在美国，对2/3的工业化饲养蛋鸡进行了接种。国际上非常需要活性疫苗。在诸如澳大利亚等国家，肉用种鸡后备家禽皆使用活性疫苗接种。在当前实践中，针对MG相关疾病的家禽预防性免疫包括使家禽在受控状态下暴露于减毒疫苗菌株或使用灭活全细胞油乳液疫苗。上述每一种方法皆具有某些缺点。例如，活性疫苗会导致疾病或损害生殖功能。灭活疫苗尽管通常可有效预防经免疫禽类中的疾病，但并不能可靠地预防感染，且可能使感染及疾病传播至未接种疫苗的禽类。在美国，接种通常仅用于多年饲养场所，因为这些场所中的各群体不可避免地会受到感染。接种的一般目的是防止饲养蛋禽的产蛋量下降，但疫苗亦可用于降低饲养家禽中经蛋传染的程度或用作在多年生产场所中消除MG的工具。重要的是需在鸡群暴露于MG野外感染之前投与活性疫苗或灭活疫苗。现有的活性疫苗通常由MG的F菌株制得，最近常用具有较高安全性的非病原性菌株ts-11及6/85菌株制备。F菌株较佳通过鼻内或经眼滴入途径施用，但亦可使用气雾或饮用水方式投与。对于ts-11建议使用经眼滴入方法，而对于6/85则建议使用喷雾法。小母鸡通常在12至16周龄期间接受接种。接种时使用单剂量就足够了，而且经过接种的禽类可永久免疫。在多年饲养场所长期使用F菌株会造成野外菌株被疫苗菌株替代。F菌株较6/85或ts-11而言可更有效地替代恶性野生型MG菌株，但ts-11已成功地用于消除多年饲养蛋鸡中的F菌株MG。亦已知，在多年生产场所长期使用6/85可使其对MG的血清学检验呈阴性。F菌株可对火鸡具有足够的毒性。美国专利第5,064,647号(发布于1991年11月12日，颁予Paul K.Storm)涉及一种基于6/85菌株的支原体疫苗。6/85菌株通过介质中的系列传代来减毒。对于鸡而言其毒性已被大大减低。尽管6/85可有效用于鸡中，但其在火鸡中并不保持其减毒状态。另一方面，ts-11是一种经过化学突变且对温度敏感的突变型菌株。其广泛用于澳洲、拉丁美洲及亚洲。其亦拥有2/3的美国市场。如6/85一样，ts-11适用于对鸡进行接种以预防MG，但不适于接种火鸡。因此，当前的活性MG疫苗存在着问题。F菌株在火鸡中具有毒性。而且，6/85及ts-11二者的减毒皆不稳定，原因是疫苗菌株具有不稳定的基因组，可使其恢复至能够导致恶性疾病的野生型。但是，随着火鸡的生长，疫苗变得不再适用，此时就会发生恶性野外MG感染。因此，当前的活性MG疫苗不适用于诸如北卡罗来纳州及明尼苏达州等大量饲养火鸡的州。另外，以色列也不允许使用活性MG疫苗。此外，6/85及ts-11菌株不能在鸡中持久存在。实际上，先前技术教示了其不能作为一种持久存在的预防机制。美国专利第5,064,647号(于1991年11月12日颁予Paul K Storm)中教示，菌株6/85的一优点是该菌株在接种于鸡4周后不再能检测出来。最后，野生型菌株可恢复导致疾病及产量下降的状态。另一方面，减毒程度较低的活性疫苗菌株不能充分预防疾病。因此，在接种持续性及减缓疾病之间存在着反比关系。另外，还本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于鸡形目禽类的预防性调配物，其包含一预防量的鸡败血支原体细菌菌株及一医药上可接受的载剂，此菌株具有一ＲＡＰＤ图案，所述ＲＡＰＤ图案实质上与保藏于ＡＴＣＣ且专利保藏编号为ＰＴＡ－４５０７的Ｋ５０５４之至少一个带状图案相同，如图１ 、２及图３所示，其中图１中的Ｋ５０５４的带状图案系使用引物ＳＥＱ．ＩＤＮＯ：４产生，其中Ｋ５０５４的带状图案系使用引物ＳＥＱ．ＩＤＮＯ．５、ＳＥＱ．ＩＤＮＯ：６及ＳＥＱ．ＩＤＮＯ．７产生，其中Ｋ５０５ ４的带状图案系使用引物ＳＥＱ．ＩＤＮＯ：８产生。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：斯坦利H克莱文，诺拉弗格森，
申请(专利权)人：美国乔治亚大学研究基金公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]