一种提高NK细胞转染效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高NK细胞转染效率的方法，本发明专利技术通过一系列对比实验，为慢病毒侵染NK细胞提供了大量可选的方案，并且阐明了不同添加物对慢病毒侵染NK细胞的效率的影响，这些方案均能取得很好的侵染效果，克服了现有技术中存在的慢病毒侵染NK细胞的侵染效率较低、操作步骤较为复杂这一技术问题，在CAR‑NK细胞制备这一技术领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学，具体地，涉及一种提高nk细胞转染效率的方法。

技术介绍

1、自然杀伤细胞(natural killer cells，简称nk细胞)是固有免疫防线的一部分，也是先天淋巴细胞的重要成员，在免疫细胞中数量占比为1％，占淋巴细胞数量的2％；nk细胞具有天然的细胞毒性，能够通过多种途径非特异性识别和杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞，这一特性使得nk细胞在肿瘤免疫治疗方面颇具前景。

2、目前，fda批准的免疫细胞治疗手段主要是car(chimeric antigen receptor，嵌合抗原受体)-t细胞治疗，在特定血液瘤的治疗上取得了显著的疗效。但目前car-t细胞治疗只能局限于自体来源的t细胞改造，并且可能产生细胞因子风暴、神经毒性等安全性问题。相比之下，nk细胞杀伤作用不依赖于mhc分子，并且安全性更高，因此，能显著降低成本，并提高安全性，具有更为广阔的发展前景。

3、目前，car-nk细胞已有多项研究进入临床研究，nk细胞来源较为广泛，包括脐血来源、外周血来源、ips来源及nk92细胞系来源等。针对car-nk细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高NK细胞转染效率的方法，其特征在于，所述方法包括使用聚凝胺、BX795和Vectofusin-1提高NK细胞的转染效率。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述NK细胞的细胞密度为20-100万/mL；

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述Vectofusin-1的使用剂量为(5-15)μL；

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述包含外源基因的病毒载体包括慢病毒载体、腺病毒载体、逆转录病毒载体、腺相关...

【技术特征摘要】

1.一种提高nk细胞转染效率的方法，其特征在于，所述方法包括使用聚凝胺、bx795和vectofusin-1提高nk细胞的转染效率。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述nk细胞的细胞密度为20-100万/ml；

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述vectofusin-1的使用剂量为(5-15)μl；

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述包含外源基因的病毒载体包括慢病毒载体、腺病毒载体、逆转录病毒载体、腺相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓科，倪丹妮，徐敬远，王瑶，顾雨春，吴理达，
申请(专利权)人：呈诺再生医学科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：