基于DNA水凝胶分离和检测肿瘤来源外泌体的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于DNA水凝胶分离的检测肿瘤来源外泌体的试剂盒及其应用，试剂盒包括T1aptamer、T2aptamer、H1、H2、引发剂；在H1的一端连接有海藻酸钠。在外泌体的表面形成外泌体‑HCR‑Alg的复合物，加入钙离子为引发剂，将外泌体包裹在DNA水凝胶中，通过低速离心实现外泌体分离和检测。再加入与钙离子结合更强的EDTA，使水凝胶变成溶胶实现外泌体的释放。本发明专利技术的试剂盒克服了目前外泌体分离和检测耗时耗力的缺点，操作简单，无需大型的仪器设备，能够分离出特异性的肿瘤来源外泌体，而且分离的外泌体具有良好的生物活性可用于后续的分析和应用，也可用于其他细胞来源的外泌体的分离和检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，尤其涉及一种基于dna水凝胶分离和检测肿瘤来源外泌体的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、外泌体因其在各种病理生理过程，特别是疾病发生发展中起着重要的作用而被广泛研究。被认为是疾病诊断和治疗监测的重要生物标志物。然而，小尺寸(30～150nm)的外泌体分离分析仍然是一个挑战。传统的外泌体分离方法包括超速离心、尺寸排阻色谱、聚合物沉淀等方法。这些方法存在耗时长、操作繁琐、需要大型仪器且分离的外泌体纯度不高等缺点。目前发展了基于膜过滤、温度敏感型聚合物等分离方法，这些方法对于特定的外泌体亚种群分离分析(肿瘤相关的外泌体)仍然是一个挑战。还发展了利用抗体和核酸适配体构建免疫亲和的方法用于外泌体的分离分析，这些方法只能够分离和分析非特异性的外泌体，对于肿瘤来源的特异性外泌体的分离和分析仍然是一个难题，尤其是复杂临床样本中大量正常细胞源性外泌体的干扰下，低丰度肿瘤来源的外泌体的分离分析仍然是一个未满足的需求。因此发展简单快速，能够分离和检测特异性肿瘤来源外泌体的方法是十分有必要的。

技术实现思路

1、本本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于DNA水凝胶分离的检测肿瘤来源外泌体的试剂盒，其特征在于，包括T1aptamer、T2 aptamer、H1、H2、引发剂；

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述引发剂为钙离子。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述T1 aptamer和T2 aptamer的浓度比为1﹕1；所述H1和H2的浓度比为1﹕1；所述引发剂的浓度为1mM。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括EDTA，所述EDTA的浓度为5mM。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述T1 aptamer为C...

【技术特征摘要】

1.一种基于dna水凝胶分离的检测肿瘤来源外泌体的试剂盒，其特征在于，包括t1aptamer、t2 aptamer、h1、h2、引发剂；

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述引发剂为钙离子。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述t1 aptamer和t2 aptamer的浓度比为1﹕1；所述h1和h2的浓度比为1﹕1；所述引发剂的浓度为1mm。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括edta，所述edta的浓度为5mm。

5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：王青，王宏强，羊小海，王柯敏，刘慧，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：