一种固定化脂肪酶的制备方法及其在催化合成甘油酯中的应用技术

技术编号:43389366 阅读:66 留言:0更新日期:2024-11-19 18:03
本发明专利技术涉及脂肪酶固定化及其催化应用领域,具体公开了一种固定化脂肪酶的制备方法及其在催化合成甘油酯中的应用,其中对大孔树脂进行预处理增加其疏水性和酶固定位点,并与含有酶缓冲液混合通过振荡结合,酶缓冲液中含有高羟基物质,增加酶与树脂的结合力以及酶催化游离脂肪酸的活性,对已经初步固化的固化脂肪酶进行物理固化,在电解条件下对氢键进行还原和增加间歇臂来提高固定化脂肪酶的疏水性实现进一步固化,并活化酶的活性残基,制得的固定化脂肪酶的稳定性高,循环利用性能强,具有高催化活性;通过固定化脂肪酶将游离脂肪酸与甘油反应转化为中性甘油酯,兼具脱酸和提高甘油酯产率等效果,具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及脂肪酶固定化及其催化应用领域,具体涉及一种固定化脂肪酶的制备方法及其在催化合成甘油酯中的应用


技术介绍

1、随着生活水平的提升,人们对健康的重视程度不断增加,食用油脂的选择问题也受到越来越多的关注,高油酸油品由于其健康益处和食用安全性,市场需求不断扩大;高油酸油品富含单不饱和脂肪酸,具有抗氧化、降低低密度脂蛋白胆固醇水平、减少心血管疾病风险等诸多健康优势;然而,诸如橄榄油、油茶籽油等高油酸含量的植物油价格较高且产量有限;目前,非转基因手段培育的高油酸花生和高油酸菜籽等是主要的高油酸植物油来源,但其生产成本依然较高;因此,寻找经济高效的生产方法以降低高油酸油品的成本成为研究的重。

2、甘油酯的制备工艺主要有化学法和生物酶法,化学法制备甘油酯反应条件苛刻,通常需要在高温高压条件下进行,并且需要使用强酸或强碱等腐蚀性试剂,存在一定的安全隐患;且存在选择性较低,副产物多,纯化步骤复杂且成本高,难以得到高纯度的dag和tag;同时,化学法催化反应通常需要消耗大量的能源,导致生产成本较高,不利于大规模工业化生产。

3、相比之下,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述大孔树脂的预处理方法为将大孔树脂以固液比为3-6:11-15mg/mL混合二元醇进行冻融循环,再加入15-25wt%的三乙氧基甲基硅烷进行水热反应。

3.根据权利要求2所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述冻融的温度为-10~-20℃,冷冻的时间为20-40min,循环的次数为3-5次;所述水热反应为在温度为100-110℃下进行反应40-60min。

4.根据权利要求1所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述大孔树脂的预处理方法为将大孔树脂以固液比为3-6:11-15mg/ml混合二元醇进行冻融循环,再加入15-25wt%的三乙氧基甲基硅烷进行水热反应。

3.根据权利要求2所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述冻融的温度为-10~-20℃,冷冻的时间为20-40min,循环的次数为3-5次;所述水热反应为在温度为100-110℃下进行反应40-60min。

4.根据权利要求1所述的一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述粗酶液的制备将10-12μl的脂肪酶calb加入试管中,再加入磷酸盐缓冲液混合制得。

【专利技术属性】
技术研发人员:钟南京郑佳薇章镪月林树平刘燕卓慧娟
申请(专利权)人:广东药科大学
类型:发明
国别省市:

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