植物外泌体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种植物外泌体及其制备方法和应用，在新鲜植物根茎中加入预冷的纯水，榨汁得到匀浆；再将匀浆在180×g～220×g条件下离心；取上清液，依次在1,800×g～2,200×g、11,500×g～12,500×g、94,500×g～95,500×g下离心；取上清液，依次通过孔径为0.45μm、0.2μm的微孔滤膜；取滤液，165,000×g～175,000×g条件下离心，弃上清；PBS重悬沉淀物，即得。采用本发明专利技术的制备方法可成功制备得到形态完整的植物外泌体，且所得的外泌体粒径集中，纯度高，得率较高，制备时间短，所得外泌体无细胞毒性，具有很好的体外抗炎作用，可为后续的科研实验与新药研发提供扎实基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药，更具体地说，本专利技术涉及一种植物外泌体尤其是山柰来源外泌体，及其制备方法和在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。

技术介绍

1、外泌体(exosomes)是一种由细胞分泌的脂质双分子层包裹的细胞外膜囊状结构的颗粒，直径在30nm～150nm之间，是属于细胞外囊泡的一种。膜内主要包含核酸、蛋白质、脂质等物质，广泛存在于各种生物体内，是一种纳米级别的脂质双分子层小泡。2013年，诺贝尔生理学或医学奖授予了james e.rothman、randy w.schekman和thomas c.südhof三位科学家，以表彰他们在外泌体等细胞外囊泡运输的调控机制作出的突出贡献，证明了外泌体极具研究价值。外泌体主要参与了生物体的各种生理和病理过程的细胞间通讯，能促进蛋白质和遗传物质的运输，相对于微泡(100nm～800nm)和凋亡小体(500nm～1200nm)，外泌体的生理活性最为显著，是目前细胞外囊泡领域里研究热度最高的部分。

2、由于外泌体是纳米级别的颗粒，体积小、总量少，因此需要特定的制备方法才能富集到纯度高、形态完整、粒径符合要本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种植物外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，在94,800×g～95,200×g条件下离心28min～32min；更优选的，在94,900×g～95,100×g条件下离心29min～31min。

3.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(6)中取上清液时，避免吸取上层漂浮的油脂层。

4.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，在190×g～210×g条件下离心9min～11min；更优选的，在195×g～205×g条件...

【技术特征摘要】

1.一种植物外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，在94,800×g～95,200×g条件下离心28min～32min；更优选的，在94,900×g～95,100×g条件下离心29min～31min。

3.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(6)中取上清液时，避免吸取上层漂浮的油脂层。

4.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，在190×g～210×g条件下离心9min～11min；更优选的，在195×g～205×g条件下离心9min～11min。

5.根据权利要求1所述的植物外泌体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，在1,900×g～2,100×g条件下离心28min～32min...

【专利技术属性】
技术研发人员：林丽珍，马晶，赵晓山，龚神海，江翠平，周兴宏，方文，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：