【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，特别涉及一种完全均相测定布鲁氏菌抗体的检测试剂盒及其应用。
技术介绍
1、布鲁氏菌病（brucellosis，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌感染导致的人兽共患传染病，在世界范围内严重影响公共卫生安全及畜牧业的健康发展，已有170多个国家有布鲁氏菌感染人的报道。人类的感染主要来源于患病动物及其产品。因此，畜间布病净化对于控制人类布病至关重要，从动物源头综合防控布病势在必行。当前我国已经将布鲁氏菌病列为法定报告动物疫病，并在全国范围内开展了布鲁氏菌病的防控工作。而准确的诊断方法是布病防控的重要环节。
2、与培养法和pcr法相比，血清学方法相对经济和简单，更适合流行地区的大规模筛查。国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》（gb/t18646—2018）和世界动物卫生组织（woah）推荐的布病血清学诊断方法主要有虎红平板凝集试验（rbt）、试管凝集试验（sat）、补体结合试验（cft）及酶联免疫吸附试验（elisa）等。但这些方法也有各自的优缺点，如sat、cft等耗时较长、方法繁琐且结果判定非常依赖于专业技术人员的经验；rbt虽然操作简单，几分钟内就能得到结果，但它的高灵敏度对接种疫苗的动物会产生假阳性，在交叉反应细菌感染的患者中也会产生假阳性反应；elisa虽然具有较高的特异性和敏感性，但试验过程需要多次洗涤和孵育，对操作人员专业要求高且步骤耗时较长。因此，目前亟需开发一种操作简便、反应速度更快、灵敏度、特异性、准确性较高的布鲁氏菌病检测方法。
技术实现思路>
1、针对现有技术中的缺陷，本专利技术提出了一种完全均相测定布鲁氏菌抗体的检测试剂盒及其应用。
2、本专利技术提供了一种完全均相测定布鲁氏菌抗体的检测试剂盒，包括a液、b液、校准品、质控品。所述试剂盒中还包含使用者提供的待测样本液。
3、进一步的，所述a液包括吖啶酯标记的布鲁氏菌抗原、辣根过氧化物酶标记的布鲁氏菌抗原。
4、进一步的，所述布鲁氏菌抗原来自牛或羊。
5、进一步的，所述a液还包括磷酸盐缓冲液、tris-hcl溶液、精氨酸、牛血清白蛋白、硫代硫酸钠、海藻糖、庶糖、甘露醇、乙二胺四乙酸二钠、peg 20000、吐温-20、ec氧化酶、酶稳定剂、甘油、抗坏血酸、尿酸、茶多酚、谷胱甘肽、硫氧还蛋白、赖氨酸、pc 300、pc 150中的一种或几种。
6、优选的，所述a液包括牛血清白蛋白、tris-hcl溶液、吐温-20、赖氨酸、pc 300、抗坏血酸、吖啶酯标记的布鲁氏菌抗原、辣根过氧化物酶标记的布鲁氏菌抗原。
7、进一步的，所述b液包括对羟基肉桂酸、过氧化氢、过氧化脲、pc 300中的一种或几种。
8、优选的，所述b液包括过氧化氢和pc 300。
9、进一步的，所述校准品为布鲁氏菌高免血清稀释液，所述布鲁氏菌高免血清稀释液的浓度为0~500 iu/ml。
10、优选的，所述布鲁氏菌高免血清稀释液的浓度为0 iu/ml、5 iu/ml、10 iu/ml、50iu/ml、100 iu/ml、500 iu/ml。
11、进一步的，所述质控品为布鲁氏菌高免血清稀释液，所述布鲁氏菌高免血清稀释液的浓度为0~200 iu/ml。
12、优选的，所述布鲁氏菌高免血清稀释液的浓度为0 iu/ml、200 iu/ml。
13、进一步的，所述a液和b液的体积比为（0.6~1）：1。
14、优选的，所述a液的体积为和b液的体积比为3：5。本专利技术实施例中提供的待测样本液与a液和b液的体积比为（1~5）：（1~5）：（5~10），优选为1：3：5；其中所述待测样本为1 μl、2μl、3 μl、4 μl、5 μl中的任意一种，所述a液为6 μl、9 μl、12 μl、15 μl、18 μl、21 μl、24 μl中的任意一种，所述b液为5 μl、10 μl、15 μl、20 μl、25 μl、35 μl、45 μl、50 μl中的任意一种。
15、本专利技术还提供了所述的检测试剂盒在非疾病诊断目的的检测布鲁氏菌抗体中的应用。
16、进一步的，所述布鲁氏菌抗体为来自牛或羊。
17、综上，与现有技术相比，本专利技术达到了以下技术效果：
18、1.本专利技术所述试剂盒采用完全均相检测，最接近体内自然状态的反应，具有简单快速、检查范围宽的特点。所述完全均相体系更利于抗原抗体的反应，反应时间可以缩短到15 min内，显著提升检测速度；同时，所述体系能提高抗原的利用率，进而提高检测的灵敏度和准确度。
19、2.本专利技术在a液中加入了抗氧化剂，能快速清除样本中的自由基或其他干扰物质，有效地控制本底，提高试剂盒的灵敏度。
20、3.本专利技术所述试剂盒无需包被、洗涤，有效控制了操作时间和成本、减少了废弃物的排放，更便于临床上的使用。
21、4.本专利技术所述试剂盒的最低检测限对应浓度为1 iu/ml，准确率极高。
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1.一种完全均相测定布鲁氏菌抗体的检测试剂盒，其特征在于，包括A液、B液、校准品、质控品。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述A液包括吖啶酯标记的布鲁氏菌抗原、辣根过氧化物酶标记的布鲁氏菌抗原。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述布鲁氏菌抗原来自牛或羊。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述A液还包括磷酸盐缓冲液、Tris-HCl溶液、精氨酸、牛血清白蛋白、硫代硫酸钠、海藻糖、庶糖、甘露醇、乙二胺四乙酸二钠、PEG 20000、吐温-20、EC氧化酶、酶稳定剂、甘油、抗坏血酸、尿酸、茶多酚、谷胱甘肽、硫氧还蛋白、赖氨酸、PC 300、PC 150中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述B液包括对羟基肉桂酸、过氧化氢、过氧化脲、PC 300中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述校准品为布鲁氏菌高免血清稀释液，所述布鲁氏菌高免血清稀释液的浓度为0~500 IU/mL。
7.根据权利要求1所述的检测试剂
8.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述A液和B液的体积比为（0.6~1）：1。
9.根据权利要求1~8任一项所述的检测试剂盒在非疾病诊断目的的检测布鲁氏菌抗体中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种完全均相测定布鲁氏菌抗体的检测试剂盒，其特征在于，包括a液、b液、校准品、质控品。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述a液包括吖啶酯标记的布鲁氏菌抗原、辣根过氧化物酶标记的布鲁氏菌抗原。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述布鲁氏菌抗原来自牛或羊。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述a液还包括磷酸盐缓冲液、tris-hcl溶液、精氨酸、牛血清白蛋白、硫代硫酸钠、海藻糖、庶糖、甘露醇、乙二胺四乙酸二钠、peg 20000、吐温-20、ec氧化酶、酶稳定剂、甘油、抗坏血酸、尿酸、茶多酚、谷胱甘肽、硫氧还蛋白、赖氨酸、pc 300、pc 150中的一种或几种。...
【专利技术属性】
技术研发人员：付巧玉，于海峰，蒋永青，洪永昌，许芳，
申请(专利权)人：深圳市绿诗源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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