一种高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种高产O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明专利技术首先通过引入可解除“葡萄糖阻遏”的CRP突变体，从而促进葡萄糖的利用和生物合成，受这种有益的CRP突变体调控的大肠杆菌可作为氨基酸类生物合成的有利底盘；其次引入外源的甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶及其突变体为代谢途径提供更多NADPH供应，实现胞内还原力的平衡，减轻高丝氨酸合成过程中消耗NADPH对细胞生长造成的压力，进一步提升OSH的产量；最终获得一株适合工业化生产的OSH生产菌株，对扩大大肠杆菌的工业应用具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物代谢工程领域，具体涉及一种高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的基因工程菌及其构建方法，以及该基因工程菌在微生物发酵制备o-琥珀酰-l-高丝氨酸中应用。

技术介绍

1、随着氨基酸产业的发展和应用领域的不断扩展，氨基酸市场也逐渐壮大。据统计，全球氨基酸市场规模已经超过200亿美元，预计未来几年将继续保持高速增长。中国是全球氨基酸生产和消费的主要国家之一，氨基酸产业也成为了中国的战略性新兴产业之一。o-琥珀酰-l-高丝氨酸(osh)是一种重要的c4平台化合物，以它为底物可以生产其他的高价值化学品，所以构建高效生产osh的细胞工厂有着广阔的工业应用前景。

2、酰基高丝氨酸最早于1964年被rowbury发现，是微生物合成l-蛋氨酸的前体物质。在微生物体内，底物高丝氨酸经催化发生酰基化得到产物酰基高丝氨酸，后经特异性途径合成蛋氨酸。酰基化过程的关键酶为高丝氨酸o-酰基转移酶，该酶有较强的底物特异性，根据不同的酰基供体，可以分为高丝氨酸琥珀酰基转移酶和高丝氨酸乙酰基转移酶。在多数真菌和少数的细菌中，会使用高丝氨酸乙酰基转移酶进行催化，如谷氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的基因工程菌的构建方法，其特征在于，

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CRP突变体选自CRPE73G/R83L/G142H、CRPR83F/G142P中的任意一种。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述GAPDH突变体选自Clostridiumacetobutylicum来源的GAPDHcaR233A、Corynebacterium glutamicum来源的GAPDHcgF100V、Corynebacterium glutamicum来源的GAPDHcg...

【技术特征摘要】

1.一种高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的基因工程菌的构建方法，其特征在于，

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述crp突变体选自crpe73g/r83l/g142h、crpr83f/g142p中的任意一种。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述gapdh突变体选自clostridiumacetobutylicum来源的gapdhcar233a、corynebacterium glutamicum来源的gapdhcgf100v、corynebacterium glutamicum来源的gapdhcgf100v/p192s中的任意一种。

5.如权利要求1～4任一所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳志强，张晓健，刘鹏，李波，丁文清，王双慧，吴琦，陈静祥，郑裕国，
申请(专利权)人：杭州优泽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：