利用适应性进化筛选得到的高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的大肠杆菌制造技术

本发明专利技术提供了一种利用适应性进化提高大肠杆菌产O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸能力的方法，以胱硫氨酸‑γ‑合酶和高丝氨酸激酶缺失且解除反馈阻遏的大肠杆菌为出发菌株，在好氧条件下使用含有不同O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸浓度的培养基对其进行试管传代压力筛选，并以此方式进行适应性进化，获得生长性能良好的高产O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸的大肠杆菌。本发明专利技术在好氧条件下利用适应性进化提高了菌株底物利用率和产物耐受能力，从而提高该菌株生产O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸的能力和糖酸转化率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物代谢工程领域，具体涉及一种利用适应性进化提高大肠杆菌产o-琥珀酰-l-高丝氨酸能力的方法，以及利用该方法筛选得到的高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的大肠杆菌。

技术介绍

1、o-琥珀酰-l-高丝氨酸(o-succinyl-l-homoserine，osh)又名o-3-羧基丙酰基-高丝氨酸，可以l-高丝氨酸为前体，通过化学合成制备。o-琥珀酰-l-高丝氨酸是l-甲硫氨酸合成的重要中间体，同时也是合成多种c4化合物和l-草铵膦等的平台化合物。随着发酵法生产生物产品技术的成熟，以及环境问题的日益严峻，发酵-酶法催化生产l-甲硫氨酸和c4化学品正逐渐成为主流。而目前osh的化学合成由于反应条件苛刻、操作危险性大、三废排放高等因素难以实现规模化生产。随着合成生物学的快速发展，构建微生物细胞工厂，利用廉价葡萄糖等为碳源来生产包括osh在内的多种高附加值产物具备广阔的生产应用前景。因此，通过微生物发酵生产osh是一种良好的绿色合成工艺。在微生物发酵合成osh的研究领域中，葡萄糖经emp途径后转化为丙酮酸，丙酮酸脱羧后产生乙酰辅酶a，通过tca循环形成天冬本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的大肠杆菌，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2024543。

2.一种利用适应性进化提高大肠杆菌产O-琥珀酰-L-高丝氨酸能力的方法，其特征在于，包括：以大肠杆菌E.coli MG1655ΔmetBΔthrBΔmetJ为出发菌株，使用含有不同O-琥珀酰-L-高丝氨酸浓度的培养基对其进行试管传代压力筛选，获得高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的大肠杆菌；所述高产O-琥珀酰-L-高丝氨酸的大肠杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2024543。

3.如权利要求2所述的方法，其特征...

【技术特征摘要】

1.一种高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的大肠杆菌，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 2024543。

2.一种利用适应性进化提高大肠杆菌产o-琥珀酰-l-高丝氨酸能力的方法，其特征在于，包括：以大肠杆菌e.coli mg1655δmetbδthrbδmetj为出发菌株，使用含有不同o-琥珀酰-l-高丝氨酸浓度的培养基对其进行试管传代压力筛选，获得高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的大肠杆菌；所述高产o-琥珀酰-l-高丝氨酸的大肠杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 2024543。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，试管传代压力筛选过程中o-琥珀酰-l-高丝氨酸的浓度范围为为5～60g/l。

4.如权利要求2所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳志强，张晓健，刘鹏，李波，陈静祥，吴琦，王双慧，丁文清，郑裕国，
申请(专利权)人：杭州优泽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：