细菌纳米纤维素胞内合成的优化实现方法技术

一种细菌纳米纤维素胞内合成的优化实现方法，包含用于生产胞内细菌纳米纤维素的木葡糖酸醋杆菌(Komagataeibacter xylinus)△acsC_132+bglB_2，保藏编号为CGMCC No.31120。本发明专利技术基于该工程菌实现了胞外BC分泌的阻断并显著提高了胞内BC产量，解决了胞外生产BC包裹缠绕菌体而导致生产周期长和生产效率低的问题，有望成为一种新的规模化生产方式。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是一种基因工程领域的技术，具体是一种细菌纳米纤维素胞内合成的优化实现方法。

技术介绍

1、细菌纳米纤维素(bacterial nano-cellulose,bc)是一种由微生物合成的胞外不可溶性多糖，由微生物胞内的bc合成酶(bcsa、bcsb、bcsc、bcsd)和一些辅助蛋白(bcsh、cmcax、bglx)调控其聚合、分泌、组装和结晶过程。木葡糖酸醋杆菌(komagataeibacterxylinus)是目前研究最多且其bc合成能力最强的微生物，属于严格好氧菌。在发酵培养基中，k.xylinus合成的bc会交错缠绕，将细胞包裹在纤维网络中，导致菌体生长缓慢并逐渐衰亡，这样的发酵特性严重影响了细菌生长和产物bc的合成，存在bc生产量及其效率低的问题。另外，目前的bc提纯方式主要是通过去离子水多次清洗去除杂质，再采用0.05-0.25m的碱性溶液高温浸泡去除菌体。然而，在碱性溶液中，bc末端的葡萄糖基会被裂解；如在高温条件下则会发生碱性水解反应，进一步破坏多糖结构，造成其聚合度下降。

技术实现思路...

【技术保护点】

1.一种用于生产胞内细菌纳米纤维素的工程菌，其特征在于，具体为：木葡糖酸醋杆菌(Komagataeibacter xylinus)△acsC_132+bglB_2，保藏编号为CGMCC No.31120，现保藏于中国科学院微生物研究所，保藏日期2024年7月1日；

2.一种权利要求1所述木葡糖酸醋杆菌△acsC_132+bglB_2的实现方法，其特征在于，以木葡糖酸醋杆菌(K.xylinus ATCC 53524)为出发菌株，敲除acsC_1、acsC_2和acsC_3基因后构建得到△acsC_132菌株；再在△acsC_132基础上，过表达bglB_2基因后构建得到。...

【技术特征摘要】

1.一种用于生产胞内细菌纳米纤维素的工程菌，其特征在于，具体为：木葡糖酸醋杆菌(komagataeibacter xylinus)△acsc_132+bglb_2，保藏编号为cgmcc no.31120，现保藏于中国科学院微生物研究所，保藏日期2024年7月1日；

2.一种权利要求1所述木葡糖酸醋杆菌△acsc_132+bglb_2的实现方法，其特征在于，以木葡糖酸醋杆菌(k.xylinus atcc 53524)为出发菌株，敲除acsc_1、acsc_2和acsc_3基因后构建得到△acsc_132菌株；再在△acsc_132基础上，过表达bglb_2基因后构建得到。

3.根据权利要求2所述的实现方法，其特征是，具体包括：

4.根据权利要求2或3所述的实现方法，其特征是，所述的acsc_1基因的核苷酸序列如...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟建江，户文亚，步国建，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：