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一种API5基因敲除THP-1细胞系及其构建方法与干扰载体技术

技术编号:43268359 阅读:30 留言:0更新日期:2024-11-08 20:45
本发明专利技术公开了一种API5基因敲除的THP‑1细胞系及其构建方法与干扰载体。本发明专利技术提供的特异性靶向API5的引物序列SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、API5干扰载体及其重组慢病毒可为多种类型的API5基因敲除细胞系构建提供基础。本发明专利技术首次公开了API5基因的新功能,它参与抗病毒天然免疫以及dsRNA介导的细胞凋亡通路的调控。此外,本发明专利技术提供的API5基因敲除的THP‑1细胞为API5基因功能的研究提供了一种强有力的细胞模型,可用于体外探究API5在调控细胞凋亡、免疫、炎症、病毒感染及癌症等的研究,可以用于药物筛选和制备,应用前景广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域,涉及一种凋亡抑制因子5(apoptosis inhibitor 5,api5)基因敲除的thp-1细胞系及其构建方法与干扰载体。


技术介绍

1、thp-1细胞系最初是从一名急性单核细胞白血病患者的外周血中分离得到的,属于人类肿瘤细胞,广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制、信号通路、病原体感染以及营养和药物运输等研究。thp-1比较接近人原代单核细胞的形态和功能特征,易于在实验室中培养和扩增,且具有更稳定的基因背景,有助于提高实验结果的重现性。因此,thp-1细胞是一种重要的研究工具,特别是在免疫学、炎症研究、药物开发和癌症研究领域,为科学家提供了一个可以重复和控制的实验模型。

2、api5(又叫aac-11,fif))蛋白是一个抗凋亡蛋白,在细胞生存和增殖中起关键作用。最初是作为一种能够抑制由缺乏生长因子引起的细胞凋亡的蛋白质被鉴定。api5能通过多种机制保护细胞免于凋亡,包括抑制某些细胞内凋亡信号通路,促进细胞增殖以及在特定条件下支持肿瘤细胞的生长和耐药性。api5与多种癌症的发生和发展密切相关,尤其是在那些对常规本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种API5基因敲除的THP-1细胞系的构建方法,其特征是:包括以下步骤:

2.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的特异性靶向API5的引物序列如SEQ IDNo.1、SEQ ID No.2所示。

3.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的API5干扰载体及其重组慢病毒。

4.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的API5基因敲除的THP-1细胞系。

5.一种根据权利要求4所述的API5基因敲除的THP-1细胞系的用途,其特征是:API5基因敲除显著抑制抗病毒天然免疫通路I型干扰素和炎症因子相关基因的表达。

6.一种根据权...

【技术特征摘要】

1.一种api5基因敲除的thp-1细胞系的构建方法,其特征是:包括以下步骤:

2.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的特异性靶向api5的引物序列如seq idno.1、seq id no.2所示。

3.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的api5干扰载体及其重组慢病毒。

4.一种根据权利要求1所述的构建方法获得的api5基因敲除的thp-1细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员:邓婷娟周继勇姚朝亮
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:

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