一种在毕赤酵母中表达人源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物的方法技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达人源IGF‑1与IGFBP3的IGF‑1结合区段复合物的方法。为了提高人IGF‑1的重组表达能力，本发明专利技术在毕赤酵母中通过融合蛋白促进目的蛋白的表达，本申请在IGF‑1的N端融合它的内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段，获得正确折叠并稳定的蛋白复合物。本发明专利技术发现融合内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段,并在两个蛋白之间利用内源蛋白酶KEX2,在毕赤酵母系统直接实现了了IGFBP3的IGF‑1结合区段与IGF‑1的复合物的表达，该复合物具有细胞增殖活性，并且表达量达到1g/L表达水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达人源igf-1与igfbp3的igf-1结合区段复合物的方法。

技术介绍

1、igf-1(insulin-like growth factor-1)是一类胰岛素样生长因子，也被称为生长调节素c，其化学结构与胰岛素相似，是体内重要的细胞因子之一。人igf-1是由70个氨基酸组成的碱性多肽链，有6个半胱氨酸(cys)，形成三对链内二硫键。血清中的大部分igf-1是与蛋白igfbp3(igf bindingprotein 3)及als(acid-labile subunit)结合组成igf-1/igfbp3/als三元复合物，该复合物可以延长igf-1的血清半衰期并调节其功能。在特定条件下，三元复合物中的igfbp3被特定的蛋白酶酶解，从而使igf-1从复合物中释放出来。释放出的igf-1特异地结合到细胞表面的igf-1受体igf1r(igf-1receptor)，使igf1r的β亚基构象发生改变，激活酪氨酸激酶活性，并级联活化pi3k-mapk通路，从而发挥其各种生物学活性。lr3 igf-1(long 本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种在毕赤酵母中表达人源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的在毕赤酵母中表达人源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源IGF-1的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源IGFBP3的IGF-1结合区段的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

3.根据权利要求1所述的在毕赤酵母中表达人源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述表达盒包括以...

【技术特征摘要】

1.一种在毕赤酵母中表达人源igf-1与igfbp3的igf-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的在毕赤酵母中表达人源igf-1与igfbp3的igf-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源igf-1的基因的核苷酸序列如seq id no：3所示；所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源igfbp3的igf-1结合区段的基因的核苷酸序列如seq id no：4所示。

3.根据权利要求1所述的在毕赤酵母中表达人源igf-1与igfbp3的igf-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述表达盒包括以下从5’端至3’端连接的元件：aox1启动子，酿酒酵母a-factor信号肽编码基因、所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源igf-1的基因、所述优化的毕赤酵母偏爱的编码人源igfbp3的igf...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红莲，黄火清，路泽群，曾湘艺，王苑，姚斌，罗会颖，王亚茹，柏映国，苏小运，秦星，田健，涂涛，张杰，王晓璐，于会民，
申请(专利权)人：中农科睿生物科技研究有限公司，
类型：发明
国别省市：