一种基于DNA三棱柱的单体探针及其制备方法与应用技术

本申请公开了一种基于DNA三棱柱的单体探针，所述单体探针包含DNA三棱柱结构以及用于检测microRNA‑21的四条发夹链H1，H2，H3和H4。其中，所述DNA三棱柱由三条DNA长链组装而成，并通过碱基互补配对原则与H1，H2，H3和H4发夹链连接。在发夹H1与H3中引入荧光标记与淬灭基团，当microRNA‑21存在时，单体探针通过杂交链反应快速形成微米级聚集体结构，伴随着荧光信号的变化，从而实现对活细胞中microRNA‑21的原位成像。通过实验验证发现，本申请公开的纳米器件灵敏度高，组装迅速，生物相容性佳，为疾病标志物诊断提供了一种重要工具。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于生物传感，涉及一种基于dna三棱柱的单体探针及其制备方法与应用。

技术介绍

1、microrna是一种内源性非编码单链rna分子，其在调节基因表达中扮演着关键角色。它们对于生物体的正常发育、细胞周期调控、细胞分化以及维持组织稳态等方面至关重要。大量研究表明，microrna的异常表达与多种严重危害健康的疾病密切相关，包括癌症、心脑血管疾病和神经退行性疾病等。microrna可作为疾病生物标志物，对其进行检测有助于疾病的早期诊断、进展监测以及预后评估。

2、无酶核酸扩增技术为检测低丰度的microrna提供了有力工具，包括催化发夹组装反应(cha)，熵驱动反应(edr)，以及杂交链反应(hcr)。其中，hcr具有一对多的信号放大特性，且其特定的线性延伸特点可以赋予核酸反应器件更多的可能性。然而，这些动态dna反应通常依赖于自由扩散反应物之间的随机碰撞，限制了它们的运行速度和效率。此外，寡核苷酸链直接进入细胞的过程具有挑战性，在复杂的生化环境中，其稳定性相对较低，容易被酶降解。此外，为提高探针递送入细胞的能力，常见探针的尺寸多为纳米级，但本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于DNA三棱柱的单体探针，其特征在于，所述单体探针包括一个DNA三棱柱，以及两组用于识别microRNA的发夹链H1和H2，H3和H4；其中，所述DNA三棱柱的上下底面包含单链区域，所述单链区域与所述H1、H2、H3和H4通过碱基互补配对连接。

2.根据权利要求1所述的基于DNA三棱柱的单体探针，其特征在于，所述DNA三棱柱由T1、T2、T3三条寡核苷酸链组装而成，所述T1、T2和T3三条寡核苷酸链的序列分别如SEQ IDNO：1-3所示。

3.根据权利要求1所述的DNA三棱柱单体探针，其特征在于，所述发夹链H1、H2、H3和H4的序列分别如SEQ ID...

【技术特征摘要】

1.一种基于dna三棱柱的单体探针，其特征在于，所述单体探针包括一个dna三棱柱，以及两组用于识别microrna的发夹链h1和h2，h3和h4；其中，所述dna三棱柱的上下底面包含单链区域，所述单链区域与所述h1、h2、h3和h4通过碱基互补配对连接。

2.根据权利要求1所述的基于dna三棱柱的单体探针，其特征在于，所述dna三棱柱由t1、t2、t3三条寡核苷酸链组装而成，所述t1、t2和t3三条寡核苷酸链的序列分别如seq idno：1-3所示。

3.根据权利要求1所述的dna三棱柱单体探针，其特征在于，所述发夹链h1、h2、h3和h4的序列分别如seq id no：4-7所示。

4.根据权利要求1所述的基于dna三棱柱的单体探针，其特征在于，所述h1与h3的5’端的第8个碱基处连接荧光基团，所述h1与h3的5’端的第34个碱基处连接淬灭基团。

5.根据权利要求4所述的基于dna三棱柱的单体探针，其特征在于，所述荧光基团选用cy5，所述淬灭基团选用bhq2。

6.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐静娟，李晓琼，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：