一种基于LAMP技术建立的茶树潜隐病毒1检测方法及其所用引物组合技术

本发明专利技术公开了一种基于LAMP技术建立的茶树潜隐病毒1检测方法及其所用引物组合。所述引物组合包括外引物CCV1‑F3和CCV1‑B3、内引物CCV1‑FIP和CCV1‑BIP、环引物CCV1‑LF和CCV1‑LB，各引物核苷酸序列依次为序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。本发明专利技术还公开了茶树潜隐病毒1LAMP试剂盒，其包括上述引物组合、Bst DNA聚合酶、缓冲液、dNTPs、Mg2+、荧光染料、阳性对照和阴性对照。本发明专利技术公开的茶树潜隐病毒1检测方法具有快速、特异性好、灵敏度高、结果判定简便等优点，适用于海关口岸出入境检疫、引种及农业生产上茶树潜隐病毒1的快速诊断，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物检疫，具体涉及一种基于lamp技术的茶树潜隐病毒1检测方法及其所用引物组合。

技术介绍

1、茶树[camellia sinensis(l.)o.kuntze]是山茶科(theaceae)山茶属(camellia)多年生木本植物，在世界范围内广泛种植。病毒病是茶树上新报道的一种病害，近年来随着茶树种植规模的不断扩大，茶树上病毒病的发生和危害日益加大，给茶叶的产量和品质造成了不同程度的影响。茶树潜隐病毒1(camellia cryptic virus 1，ccv1)是双分病毒科(partitiviridae)、丁型双分病毒属(deltapartitivirus)成员。该病毒粒体为等轴状，无膜包被。ccv1基因组包含3条双链rna(double-stranded rna，dsrna)组分，dsrna-1的大小为1681bp，其orf位于第157-1590nts位置，编码rdrp；dsrna-2的大小为1410bp，其orf位于第164-1195nts位置，编码外壳蛋白(coat protein，cp)；dsrna-3的大小为1318bp，其or本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测茶树潜隐病毒1的引物组，所述引物组由外引物CCV1-F3、外引物CCV1-B3、内引物CCV1-FIP、内引物CCV1-BIP、环引物CCV1-LF和环引物CCV1-LB组成；

2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于：所述外引物CCV1-F3、所述外引物CCV1-B3、所述内引物CCV1-FIP、所述内引物CCV1-BIP、所述环引物CCV1-LF和所述环引物CCV1-LB的摩尔比为1:1:8:8:2:2。

3.用于检测茶树潜隐病毒1的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组、RNA提取试剂、将RNA反转录为cDNA的试剂和用于环介导等温扩...

【技术特征摘要】

1.用于检测茶树潜隐病毒1的引物组，所述引物组由外引物ccv1-f3、外引物ccv1-b3、内引物ccv1-fip、内引物ccv1-bip、环引物ccv1-lf和环引物ccv1-lb组成；

2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于：所述外引物ccv1-f3、所述外引物ccv1-b3、所述内引物ccv1-fip、所述内引物ccv1-bip、所述环引物ccv1-lf和所述环引物ccv1-lb的摩尔比为1:1:8:8:2:2。

3.用于检测茶树潜隐病毒1的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组、rna提取试剂、将rna反转录为cdna的试剂和用于环介导等温扩增的其它试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述用于环介导等温扩增的其它试剂包括bst dna聚合酶、缓冲液、mg2+、dntps。

5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括荧光染料。

6....

【专利技术属性】
技术研发人员：沈建国，高芳銮，陈细红，蔡伟，廖富荣，谢丽雪，于翠，张永江，
申请(专利权)人：福州海关技术中心，
类型：发明
国别省市：