一种具有强耐碱性能的重组Protein A蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，涉及一种具有强耐碱性能的重组Protein A蛋白及其制备方法和应用。本发明专利技术在公开的Protein A蛋白序列（SEQ ID No.1）基础上采用基因工程手段，得到了新的重组蛋白序列。本发明专利技术通过对氨基酸序列重新设计，从而提供一种对抗体具有特异性结合作用的Protein A，其在碱性条件下具有良好的化学稳定性，可耐受>0.5M NaOH。本发明专利技术可用以Protein A亲和介质等场景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及一种具有强耐碱性能的重组protein a蛋白及其制备方法和应用。

技术介绍

1、天然 protein a 是从原核金黄色葡萄球菌分离，在生物医药领域其对于igg的fc段具有特异性的亲和作用，而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合。一步纯化即可获得纯度85%以上的igg。

2、当前常用protein a蛋白不能耐受强碱，强碱处理后发生分解。在生物医药抗体制备中，protein a蛋白与琼脂糖偶联制备成亲和层析介质，强碱的清洗会导致protein a蛋白发生分解，降低了抗体的回收率，提高生产成本等问题。 因此提升protein a蛋白在强碱条件下的耐受性是急需解决的问题。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本专利技术提供一种具有强耐碱性能的重组protein a蛋白及其制备方法和应用。本专利技术选择天然protein a蛋白zvar区域（seq id no.1）进行改造，改造后得到的重组protein a蛋白具有较好的耐碱性能。

2、本专利技术提供的技术方案如本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种具有强耐碱性能的重组Protein A蛋白，其特征在于，所述具有强耐碱性能的重组Protein A蛋白是将Protein A蛋白A结构域中的一个或多个氨基酸替换成为突变体，所述A结构域的序列如SEQ ID No.1所示，所述突变体的突变位置包括SEQ ID No.1中的第20、21、48位的一个或多个。

2. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组Protein A蛋白，其特征在于，所述突变体的突变位置包括SEQ ID No.1中的第20位，SEQ ID No.1的第20位的脯氨酸突变为丙氨酸或亮氨酸。

3. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组Prote...

【技术特征摘要】

1. 一种具有强耐碱性能的重组protein a蛋白，其特征在于，所述具有强耐碱性能的重组protein a蛋白是将protein a蛋白a结构域中的一个或多个氨基酸替换成为突变体，所述a结构域的序列如seq id no.1所示，所述突变体的突变位置包括seq id no.1中的第20、21、48位的一个或多个。

2. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组protein a蛋白，其特征在于，所述突变体的突变位置包括seq id no.1中的第20位，seq id no.1的第20位的脯氨酸突变为丙氨酸或亮氨酸。

3. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组protein a蛋白，其特征在于，所述突变体的突变位置包括seq id no.1中的第21位，seq id no.1的第21位的天冬酰胺突变为组氨酸或脯氨酸。

4. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组protein a蛋白，其特征在于，所述突变体的突变位置包括seq id no.1中的第48位，seq id no.1的48位的丙氨酸突变为赖氨酸、精氨酸、组氨酸。

5. 根据权利要求1所述的强耐碱性能的重组protein a蛋白，其特征在于，所述突变体的突变位置还包括seq id no.1中的第9、11、15、28、40、42、43、44位的一个或多个。

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【专利技术属性】
技术研发人员：束艳方，屈雨飞，吴静云，王鑫，
申请(专利权)人：苏州可尔生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：