一种产气荚膜梭菌的分离和鉴定方法技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及一种产气荚膜梭菌的分离和鉴定方法。本发明专利技术分离方法包括以下步骤：将待测病料进行增菌培养，得到初始菌液；将初始菌液进行稀释，将稀释菌液与TSN培养基混合，铺于培养皿中；待培养基完全凝固后，在培养基表面上覆盖一层TSN培养基，恒温培养，得到产气荚膜梭菌单菌落；挑取单菌落接种于培养基中进行培养，得到产气荚膜梭菌的菌液。本发明专利技术分离方法具有成本低、配制方法简单、污染概率极低、分离率高的技术优势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物，具体涉及一种产气荚膜梭菌的分离和鉴定方法。

技术介绍

1、产气荚膜梭菌(clostridium perfringens，cp)曾称魏氏梭菌或产气荚膜杆菌，是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌，因能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量气体，导致组织严重气肿，继而影响血液供应，造成组织大面积坏死，加之本菌在体内能形成荚膜，故名产气荚膜梭菌。产气荚膜梭菌能引起羔羊痢疾和羔羊、牛犊、仔猪、家兔、雏鸡等的坏死性肠炎。产气荚膜梭菌形成的毒性物质有12种，可损伤细胞膜、血管内皮细胞并使糖类分解，导致细胞坏死、组织水肿、充气等病变。根据产生毒素种类和致病性的不同，产气荚膜梭菌有a、b、c、d、e、f6个型。

2、目前，在实验室分离产气荚膜梭菌时，常用的方法有血琼脂平板划线分离法、sps平板法、tsc-卵黄平板法、cw平板法等，产气荚膜梭菌为厌氧菌，且对厌氧要求较为严格，对培养基要求也较高，该菌在不同的培养基上表现出不同的生长特性。

3、产气荚膜梭菌在5％绵羊血琼脂平板上，呈现带有双溶血环的菌落形态，内层完全溶血，外层不完全溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种产气荚膜梭菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，S1中，所述待测病料选自动物病变组织、动物肠内容物和疑似污染物，所述疑似污染物包括饲料、食品。

3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，S1中，所述增菌培养采用FTG液体培养基；

4.根据权利要求3所述的分离方法，其特征在于，所述FTG液体培养基的组成为：胰蛋白胨、酵母膏粉、刃天青、L-胱氨酸、氯化钠、葡萄糖、硫乙醇酸钠、琼脂。

5.根据权利要求1～4任一项所述的分离方法，其特征在于，S2中，所述TSN培养基中含有：胰蛋白胨、酵母...

【技术特征摘要】

1.一种产气荚膜梭菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，s1中，所述待测病料选自动物病变组织、动物肠内容物和疑似污染物，所述疑似污染物包括饲料、食品。

3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，s1中，所述增菌培养采用ftg液体培养基；

4.根据权利要求3所述的分离方法，其特征在于，所述ftg液体培养基的组成为：胰蛋白胨、酵母膏粉、刃天青、l-胱氨酸、氯化钠、葡萄糖、硫乙醇酸钠、琼脂。

5.根据权利要求1～4任一项所述的分离方法，其特征在于，s2中，所述tsn培养基中含有：胰蛋白胨、酵母浸粉、亚硫酸钠、柠檬酸铁、多粘菌素b、硫酸新霉素、琼脂。

6.根据权利要求1～4任一项所述的分离方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王凤雪，蔺冰冰，温永俊，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：