检测猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR Green I试剂盒及检测方法技术

技术编号:42883772 阅读:20 留言:0更新日期:2024-09-30 15:06
本发明专利技术公开了一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测试剂盒。该试剂盒包括特异性引物、PCR反应液和阳性对照品、阴性对照品等。所设计的特异性引物能特异性地扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的保守ORF7基因片段。本试剂盒采用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术,具有高灵敏度、高特异性、快速准确、重复性好等优点。能够对猪繁殖与呼吸综合征病毒进行早期检测和定量分析,为猪繁殖与呼吸综合征的防控和诊断提供了有力的技术支持。适用于兽医临床检测、养殖场疫病监测以及相关科研工作,有效降低猪繁殖与呼吸综合征带来的经济损失和危害。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的sybrgreen i实时荧光定量pcr检测试剂盒。


技术介绍

1、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,prrs)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndromevirus,prrsv)引起的一种严重危害养猪业的传染病。prrsv感染可导致母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病,给养猪业造成巨大的经济损失。因此,建立一种快速、准确、灵敏的检测方法对于prrs的防控具有重要意义。

2、目前,检测prrsv的方法主要包括病毒分离培养、血清学检测和分子生物学检测等。病毒分离培养是诊断prrsv的金标准,但该方法费时费力,且敏感性较低。血清学检测方法如酶联免疫吸附试验(elisa)等操作简便,但特异性和敏感性有待提高。分子生物学检测方法如聚合酶链反应(pcr)和实时荧光定量pcr等具有特异性强、敏感性高、快速等优点,已成为检测prrsv的重要手段。

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【技术保护点】

1.一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的SYBR Green I试剂盒,其特征在于,包括以下试剂:

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述2×PCR缓冲液包含pH的8.3的Tris-HCl、KCl和(NH4)2SO4。

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述dNTPs包括dATP、dTTP、dCTP和dGTP,各成分的浓度均为2.5mM。

4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述MgCl2的浓度为25mM。

5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述SYBR Green I荧光染料的工作浓度为1×。

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【技术特征摘要】

1.一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的sybr green i试剂盒,其特征在于,包括以下试剂:

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述2×pcr缓冲液包含ph的8.3的tris-hcl、kcl和(nh4)2so4。

3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述dntps包括datp、dttp、dctp和dgtp,各成分的浓度均为2.5mm。

4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述mgcl2的浓度为25mm。

5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述sybr green i荧光染料的工作浓度为1×。

6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照中猪繁殖与呼吸综合征病毒基因片段的长度为81bp。

7.根据权利要求1任...

【专利技术属性】
技术研发人员:王帅
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:

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