抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体、结合表位分析方法技术

本发明专利技术属于抗体技术领域，具体涉及抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体、结合表位分析方法。VZV gE蛋白为免疫原免疫小鼠，确定蛋白效价，融合实验，亚克隆实验，得到单克隆抗体，分析方法：确定抗体识别表位均为构象表位；分析VZV gE蛋白完整结构，预测二硫键位置及抗原表位；对预测形成二硫键或影响二硫键形成的VZV gE序列中的半胱氨酸残基逐个突变和鉴定；将重组突变质粒进行转染与表达，检测突变及野生型蛋白表达；检测单克隆抗体活性；检测相同表达量的突变蛋白分别对应单克隆抗体的活性；检测单克隆抗体亲和力。应用：药物组合物、试剂、试纸条或试剂盒、生物制品。本发明专利技术填补了目前针对VZV gE蛋白抗原构象表位分析的空缺。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗体，具体涉及抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体、结合表位分析方法。

技术介绍

1、抗原表位（antigenic epitope）是存在于抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。在蛋白质分子类抗原中，由于其结构的相对复杂性，常含有多种不同的抗原表位。由连续性线性排列的氨基酸残基组成的短肽所构成的抗原表位为线性抗原表位；有些氨基酸虽然在序列上不连续性排列，但在空间上形成特定的构象，又称为空间表位。抗原表位是蛋白质抗性的基础，所以，深入研究蛋白质抗原表位对疾病的诊断及预后判定，定点改造蛋白质分子以降低蛋白质药物的免疫原性，或者设计高免疫原性无毒副作用重组蛋白类疫苗等具有重要意义。

2、进一步的，以筛选免疫效应靶分子而获得抗原片段已成为新疫苗设计的关键技术，即抗原表位已成为疫苗设计中所考虑的基本出发点。蛋白质的抗原特异性主要限制在特定的抗原决定簇（antigenic determinant）上，对诱导体液免疫应答为主的免疫应答，要考虑病原体抗原成分中的b细胞抗原位点，即b细胞表位（b-cell epitope），多数b细胞表位是通过抗体和本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白E单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，预测VZV gE蛋白共有3对二硫键分别为：C387-C413、C396-C405、C432-C442或者预测VZV gE蛋白共有5对二硫键分别为：C208-C236、C220-C226、C387-C413、C396-C405、C432-C442。

4.根据权利要求1所述的抗带状疱疹...

【技术特征摘要】

1.抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，预测vzv ge蛋白共有3对二硫键分别为：c387-c413、c396-c405、c432-c442或者预测vzv ge蛋白共有5对二硫键分别为：c208-c236、c220-c226、c387-c413、c396-c405、c432-c442。

4.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，所述生物信息学分析包括以下步骤：

5.根据权利要求3所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，预测vzv序列进行免疫原性分析，得到预计有免疫原性的抗原表位，与构成二硫键的半胱氨酸重叠的抗原决定簇分别为aa200-aa210、aa212-236、aa346-407、aa413-432、aa437-445。

6.根据权利要求1所述的抗带状疱疹病毒糖蛋白e单克隆抗体结合表位的分析方法，其特征在于，所述定点突变分别为：c208、c236、c387、c405、c413、c432、c442、h41...

【专利技术属性】
技术研发人员：周明，赵鹏举，姚媛，周耿，苏宝玉，秦贞琴，叶涛，
申请(专利权)人：简达生物医药南京有限公司，
类型：发明
国别省市：