一种酵母表达三螺旋结构Ⅰ型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用技术

技术编号:42789715 阅读:67 留言:0更新日期:2024-09-21 00:47
本发明专利技术公开了一种酵母表达三螺旋结构Ⅰ型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用,涉及生物技术领域。该制备方法包括利用工程菌发酵纯化得到该三螺旋结构Ⅰ型重组人胶原蛋白的步骤;该工程菌的构建方法包括将pMChZ‑α1(Ⅰ)、pMCrN‑α2(Ⅰ)、pPIC9K‑P4H(DP)‑1和pMCeH‑[α1(Ⅰ)]<subgt;2</subgt;α2(Ⅰ)质粒转化宿主菌,构建得到该工程菌的步骤。利用该制备方法制备得到的具有三螺旋结构的Ⅰ型重组人胶原蛋白含有羟脯氨酸,羟脯氨酸达到总脯氨酸的30%以上。从而可以使得Ⅰ型重组人胶原蛋白能够广泛用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域,具有很好的实用性和重要的市场应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,特别是涉及一种酵母表达三螺旋结构ⅰ型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用。


技术介绍

1、胶原蛋白是生物体内一种非常重要的蛋白质,由三条左旋α肽链互相缠绕形成右手三螺旋结构,其中ⅰ型胶原蛋白是是人体中含量最丰富的具有三螺旋结构的胶原蛋白之一,在维护皮肤健康和骨组织结构完整等方面发挥了重要作用。人体中ⅰ型胶原蛋白多是由两条α1链和一条α2链组成的异源三聚体,这种三螺旋结构赋予了胶原蛋白良好的生物力学性能和生物相容性,使得它在维持皮肤弹性、骨骼强度以及肌腱韧性等方面发挥着关键作用。

2、重组人i型胶原蛋白作为天然人胶原的替代物,被广泛应用于抑制和缓解皮炎、改善敏感性肌肤、护养术后创面等方面,在功能性生物材料、化妆品和食品等领域发挥巨大作用。目前市面上的重组人i型胶原蛋白产品多为重组人源胶原蛋白或重组类胶原蛋白,可在微生物中以较低成本获得大量表达,但这种胶原蛋白没有三螺旋结构。单链胶原的力学性能也远不及三螺旋胶原,在需要较高力学强度的应用场景难以胜任。因此亟需开发一种三螺旋结构ⅰ型重组人胶原蛋白的制备方法。


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【技术保护点】

1.一种表达三螺旋结构Ⅰ型重组人胶原蛋白的工程菌的构建方法,其特征在于,包括将pMChZ-α1(Ⅰ)质粒、pMCrN-α2(Ⅰ)质粒、pPIC9K-P4H(DP)-1质粒和pMCeH-[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)-质粒转化宿主菌,构建得到所述工程菌的步骤;

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法具体包括以下步骤:

3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述宿主菌为毕赤酵母X33或毕赤酵母KM71。

4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述pPIC9K质粒中位于αMF上游的BamHⅠ通过点突变删除。

5.一...

【技术特征摘要】

1.一种表达三螺旋结构ⅰ型重组人胶原蛋白的工程菌的构建方法,其特征在于,包括将pmchz-α1(ⅰ)质粒、pmcrn-α2(ⅰ)质粒、ppic9k-p4h(dp)-1质粒和pmceh-[α1(ⅰ)]2α2(ⅰ)-质粒转化宿主菌,构建得到所述工程菌的步骤;

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法具体包括以下步骤:

3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述宿主菌为毕赤酵母x33或毕赤酵母km71。

4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述ppic9k质粒中位于αmf上游的bamhⅰ通过点突变删除。...

【专利技术属性】
技术研发人员:翟源心储筠李解凡孝菊付生伟钱晨明李丹璐钱松
申请(专利权)人:江苏创健医疗科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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