一种毕赤酵母的连续发酵工艺制造技术

本发明专利技术提供了一种适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，属于生物工程技术领域；本发明专利技术通过降低一级种子罐培养基和发酵罐培养基中整体的盐浓度，加快毕赤酵母生产速度，以此减少毕赤酵母发酵生产外源产物过程中在种子罐内的培养时间和发酵罐诱导前的用时，有效缩短了发酵生产的周期；本发明专利技术所述连续发酵工艺通过连续诱导培养，大幅提升了单批次的产量，极大的提高了产能，为规模化生产带来了巨大的经济效益；本发明专利技术所述连续发酵工艺降低了在相同产量下所需的人力和能源，减少了过多的操作，既能降低生产成本又能降低染菌风险，适用于大规模的毕赤酵母连续发酵生产外源产物，具有很好的实用性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种适用于毕赤酵母的连续发酵工艺。

技术介绍

1、毕赤酵母作为一种高效的表达系统，在生产外源产物方面具有显著的优势：(1)毕赤酵母表达水平高，既可胞内表达，也可分泌型表达，能更好地满足大规模生产的需求；(2)毕赤酵母拥有特有的醇氧化酶基因(aox)启动子，能被甲醇严格调控，这种精准的调控机制有利于控制蛋白的表达时机和产量；(3)毕赤酵母是一种安全的微生物，在生产生物制品时，无需担心引入有害杂质对人体健康造成危害，提高了产品的安全性和质量；(4)毕赤酵母工程菌具有较好的遗传稳定性，在多次传代培养和发酵过程中，外源基因能够稳定存在并持续表达，保证了生产过程中产品质量和产量的稳定性。

2、尽管毕赤酵母表达系统具有上述优势，但是其仍然存在一些劣势，如：毕赤酵母表达系统依赖甲醇作为诱导剂来启动外源基因的表达，但甲醇具有毒性，其浓度的精确控制对细胞生长和产物表达至关重要；除了碳源外，毕赤酵母对氮源、磷源、微量元素及维生素等营养物质的种类和浓度要求较为严格；毕赤酵母对发酵过程中的温度、ph值、溶氧量等环境因素敏感，需要专业的发本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，所述连续发酵工艺包括：

2.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述摇瓶种子培养基经灭菌处理，所述摇瓶种子培养基为毕赤酵母YPD摇瓶种子培养基。

3.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述摇瓶培养的条件为：在30.0±1.0℃、220±10rpm的条件下进行培养，直至种子液中发酵菌种毕赤酵母OD600值达到2～8。

4.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(2)中，种子液接种前，调节一级种子罐...

【技术特征摘要】

1.一种适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，所述连续发酵工艺包括：

2.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述摇瓶种子培养基经灭菌处理，所述摇瓶种子培养基为毕赤酵母ypd摇瓶种子培养基。

3.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述摇瓶培养的条件为：在30.0±1.0℃、220±10rpm的条件下进行培养，直至种子液中发酵菌种毕赤酵母od600值达到2～8。

4.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(2)中，种子液接种前，调节一级种子罐培养基的转速为300rpm、通气量12l/min、温度30℃，并用浓氨水控制一级种子罐培养基的ph为5.0。

5.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(2)中，种子液的接种量为10％。

6.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(2)中，所述一级种子罐培养基的成分为：85wt％h3po4 13.35ml/l、caso4·2h2o 0.465g/l、k2so49.1g/l、mgso4·7h2o 7.45g/l、koh 2.065g/l、甘油20g/l、ptm1溶液2ml/l、纯化水定容。

7.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，其特征在于，步骤(3)中，所述发酵罐中添加有灭菌处理后的发酵罐培养基，所述发酵罐培养基的成分包括：

8.根据权利要求1所述的适用于毕赤酵母的连续发酵工艺，...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱晨明，李佳佳，殷同，徐园，李忠浩，凡孝菊，钱松，
申请(专利权)人：江苏创健医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：