植物中的靶向基因整合制造技术

本发明专利技术涉及一种适用于在植物的多聚泛素基因的5'端或3'端靶向整合至少一个感兴趣基因的载体。本发明专利技术还涉及所述载体在用于在植物基因组中靶向插入至少一个感兴趣基因的方法的用途，以及通过用所述载体转化获得的植物细胞或植物组织。本发明专利技术还涉及一种鉴定植物的方法，该植物具有插入多聚泛素基因的5'端或3'端的至少一个感兴趣基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及在植物中靶向整合感兴趣基因。

技术介绍

1、基因修饰的植物通常需要组成型和高水平的转基因表达，以获得所需的新农艺性状。这通常是通过用一个或多个转基因盒转化植物来实现的，转基因盒包括与引起新性状的感兴趣基因(goi)相连的组成型启动子和植物转录物多聚腺苷酸化序列。使用生物或农杆菌转基因递送产生的转基因转化事件通常随机整合到植物基因组中。

2、然而，由于以下几个原因，这种方法并不理想。首先，转基因可能会整合到内源基因中，可能会导致这些内源基因的功能丧失或改变，从而导致不良表型，有时是多效表型。其次，转基因的表达水平可受周围基因组环境的调节。每个转基因事件都可能有不同的表达水平和时空表达谱。第三，转基因事件往往有多个转基因插入；这些通常会被丢弃。第四，转基因的随机插入可能会产生新的开放阅读框，从而阻止或减缓转基因事件的解除调控。这些因素加在一起，导致需要制造1000个或更多的初级植物转化体，才能获得商业上和农艺学上可接受的基因修饰事件。

3、将转基因定位在基因组中的确定位置(称为“着陆台(landing pad)”)可以解决本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种适用于在植物的多聚泛素基因的5'端或3'端靶向整合至少一个感兴趣基因的载体，其中，所述载体包括修复DNA，所述修复DNA从5'端到3'端包括：

2.根据权利要求1所述的载体，进一步包括：

3.根据权利要求2所述的载体，其中，所述载体包括单个gRNA表达盒。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的载体，其中，所述感兴趣基因选自由除草剂耐受基因、抗昆虫基因、抗真菌基因、抗细菌基因、抗胁迫基因、与繁殖能力有关的基因、与田间表现有关的基因、与工业加工表现有关的基因和与植物营养价值有关的基因组成的组。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的载体，...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种适用于在植物的多聚泛素基因的5'端或3'端靶向整合至少一个感兴趣基因的载体，其中，所述载体包括修复dna，所述修复dna从5'端到3'端包括：

2.根据权利要求1所述的载体，进一步包括：

3.根据权利要求2所述的载体，其中，所述载体包括单个grna表达盒。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的载体，其中，所述感兴趣基因选自由除草剂耐受基因、抗昆虫基因、抗真菌基因、抗细菌基因、抗胁迫基因、与繁殖能力有关的基因、与田间表现有关的基因、与工业加工表现有关的基因和与植物营养价值有关的基因组成的组。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的载体，其中，所述感兴趣基因选自由bar基因、als基因、gs基因、细胞色素p450基因、rfl29a基因、rfl79基因、rfo基因、cry1ac基因和rca-cry1ac基因组成的组。

6.一种植物细胞或植物组织，其包含插入多聚泛素基因的5'端或3'端的至少一个感兴趣基因，所述植物细胞或植物组织通过用根据权利要求1至5中任一项所述的载体转化获得。

7.根据权利要求6所述的植物细胞或植物组织，所述植物细胞或植物组织是原生质体、顶端分生组织、子叶、胚、花粉或小孢子。

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【专利技术属性】
技术研发人员：怀亚特·保罗，帕斯夸尔·佩雷斯，雅克·鲁斯特，
申请(专利权)人：利马格兰集团，
类型：发明
国别省市：