靶向敲除RBPH1基因的sgRNA、载体、慢病毒及其方法和应用技术

本发明专利技术公开了靶向敲除RBPH1基因的sgRNA，sgRNA包括两条核苷酸序列，分别为RBPH1‑sgRNA1和RBPH1‑sgRNA2，RBPH1‑sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2，RBPH1‑sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示。本发明专利技术还公开了靶向敲除RBPH1基因的载体及其构建方法、慢病毒包装方法及应用，能有效调节前列腺癌细胞的增殖及迁移能力，为前列腺癌的一线研究提供一种新方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因编辑，具体涉及靶向敲除rbph1基因的sgrna，本专利技术还涉及靶向敲除rbph1基因的载体、慢病毒及其方法和应用。

技术介绍

1、前列腺癌是男性常见恶性肿瘤，更是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤。近年来随着人均寿命的提高和生活方式的改变，我国前列腺癌的发病率和死亡率保持逐年增长的趋势。最新发布的2022年中国恶性肿瘤流行情况分析显示，我国前列腺癌的新发病例数约为13.42万例，新增死亡例数约为4.75万例，在男性泌尿生殖系统肿瘤中均排在第1位。前列腺癌根治术(radical prostatectomy，rp)及内分泌疗法是目前治疗前列腺癌的一线疗法，但是这些疗法对早期前列腺癌患者具有较好疗效，对于转移后的恶性前列腺癌患者由于耐药问题疗效并不理想，因此新的前列腺癌诊断及预后靶点的开发至关重要。

2、内质网核糖体结合糖蛋白1(ribophorin i，rbph1)是寡糖基转移酶复合物(oligosaccharyl transferase complex，ost)的组成之一，对n-连接糖基化至关重要。n-连接糖基化是真核细胞中常见的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.靶向敲除RBPH1基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA包括两条核苷酸序列，分别为RBPH1-sgRNA1和RBPH1-sgRNA2，所述RBPH1-sgRNA1的核苷酸序列如SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2，所述RBPH1-sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示。

2.靶向敲除RBPH1基因的载体，其特征在于，所述载体为包含权利要求1所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

3.根据权利要求2所述的靶向敲除RBPH1基因的载体，其特征在于，所述CRISPR/Cas9载体是通过将靶向敲除RBPH1基因...

【技术特征摘要】

1.靶向敲除rbph1基因的sgrna，其特征在于，所述sgrna包括两条核苷酸序列，分别为rbph1-sgrna1和rbph1-sgrna2，所述rbph1-sgrna1的核苷酸序列如seq id no.1、seq idno.2，所述rbph1-sgrna2的核苷酸序列如seq id no.3、seq id no.4所示。

2.靶向敲除rbph1基因的载体，其特征在于，所述载体为包含权利要求1所述sgrna的crispr/cas9载体。

3.根据权利要求2所述的靶向敲除rbph1基因的载体，其特征在于，所述crispr/cas9载体是通过将靶向敲除rbph1基因的sgrna插入crispr/cas9载体lenticrisprv2所得。

4.根据权利要求2所述的靶向敲除rbph1基因的载体，其特征在于，所述crispr/cas9载体能够特异性在基因组上敲除rbph1在前列腺癌细胞中的表达，从而调控前列腺癌细胞增殖、迁移及克隆形成。

5.根据权利要求2-4任一所述的靶向敲除rbph1基因的载体的构建方法，其特征在于，具体按以下步骤实施：合成用于编码rbph1基因的核苷酸片段；用限制性...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨娟，门可，张东宁，谭娇，马柏如，
申请(专利权)人：西安医学院，
类型：发明
国别省市：