【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于梨基因功能研究，具体涉及一种利用梨果实愈伤组织进行基因功能验证的方法。
技术介绍
1、由于木本植物转基因植株获得困难，梨基因功能研究一直缺乏同源转化验证体系，严重阻碍了梨树分子育种的进程。长期以来，对于梨基因功能的研究，多限制于以下两种方式：①将梨基因异源表达于模式植物如烟草（yao et al 2017）和拟南芥（zhang et al2021，gong et al 2023）中，但由于物种的遗传背景差异，常无法获得满意的研究结果；②通过瞬时转化将外源基因导入梨宿主细胞中（xue et al 2019），但因为瞬时转化的外源dna无法整合到宿主基因组中，不能产生遗传后代，这些原因均对基因功能研究产生影响（李刚等，2021）。由于缺乏高效的同源转化体系，基因资源的功能验证及分子育种受到挑战，妨碍了梨产业迈向绿色健康发展的步伐。
2、将植物器官诱导产生的愈伤组织作为转化受体，利用农杆菌将目的基因转入愈伤组织细胞研究基因功能，具有周期短、效率高的优点，此方法已在葡萄（cheng et al 2021，yu et a...
【技术保护点】
1.一种利用梨果实愈伤组织进行基因功能验证的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述三季梨果实为未成熟果实、成熟果实中的任一种。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（1）中，将三季梨酒精消毒并去除表皮后再切取成直径0.5-1 cm的块状或0.1-0.3 cm厚的薄片，且所述培养为暗培养15-20d。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述继代培养的时间为10-15 d。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，将愈伤组织置于OD600为...
【技术特征摘要】
1.一种利用梨果实愈伤组织进行基因功能验证的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述三季梨果实为未成熟果实、成熟果实中的任一种。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（1）中，将三季梨酒精消毒并去除表皮后再切取成直径0.5-1 cm的块状或0.1-0.3 cm厚的薄片，且所述培养为暗培养15-20d。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述继代培养的时间为10-15 d。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（3）中，将愈伤组织置于od600为0.8-1.2的农杆菌侵染液中...
【专利技术属性】
技术研发人员：王利平，吕沙妹，王东升，杨晓平，刘毓，洪霓，王国平，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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