一种肝脏高转移胰腺癌细胞系及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种肝脏高转移胰腺癌细胞系及其构建方法与应用，属于胰腺癌细胞系构建的技术领域。包括以下步骤：(1)消化胰腺癌肝转移灶，去除非肿瘤细胞和细胞碎片，得到细胞悬液a，贴壁培养、消化得细胞重悬液；(2)细胞重悬液在培养装置中静置后，吸出细胞重悬液；(3)重复步骤(2)3～5次后，消化、收集细胞悬浊液；(4)将细胞悬浊液导入动物脾脏被膜下，10～31天后分离得到胰腺癌肝转移灶；(5)重复步骤(1)～(4)4～6次后，得到肝脏高转移胰腺癌细胞系。本发明专利技术的肝脏高转移胰腺癌细胞系具有肝脏高转移率，且能在体外稳定存活并稳定传代，为胰腺癌肝转移的抗肿瘤药物筛选等提供了实验平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于胰腺癌细胞系构建，尤其涉及一种肝脏高转移胰腺癌细胞系及其构建方法与应用。

技术介绍

1、胰腺癌是一种恶性程度极高的胃肠道肿瘤，五年总体生存率不足10％，而且大部分患者在初始诊断时已发生远处转移，肝脏是远距离转移的主要部位。随着对肿瘤研究的进一步认识，肿瘤微环境、肿瘤免疫环境等方向的新发现对研究平台反映癌症发生的真实性的要求更加严苛。能真实反应肝转移的分子生物学机制及相关免疫微环境背景且具有稳定器官特异性高转移的肿瘤细胞系可以为癌症转移研究提供科学研究的工具。

2、目前普遍采取的从已有细胞系筛选胰腺癌转移株的方法，主要方法大致分为如下：

3、(1)经胰腺体内筛选：此方法是将胰腺癌细胞注射入小鼠胰腺尾部，形成原位的胰腺癌肿瘤模型，待肿瘤细胞自发转移到肝脏形成转移灶后获取细胞株。

4、(2)经门静脉体内筛选：识别并暴露胰头后部的门静脉，将肿瘤细胞注射到门静脉中，使肿瘤细胞通过门静脉进入肝脏，在肝脏生长形成实验性转移灶，随后从肝脏转移灶上获取细胞株。

5、但现有的转移模型构建方法存在以下缺点：

<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肝脏高转移胰腺癌细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，所述胰腺癌肝转移灶的制备方法包括：将胰腺癌细胞导入动物脾脏被膜下，10～31天后分离得到胰腺癌肝转移灶。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述贴壁培养的培养基包括2～4mM的L-谷氨酰胺，1000～4500mg/L的葡萄糖，1.0～1.2mM的丙酮酸钠，2200～4000mg/L的碳酸氢钠，2％～20％胎牛血清和1％抗生素；所述消化采用0.2％～0.3％胰酶；所述静置的时间为1～5min。

4.根据权利要求1～...

【技术特征摘要】

1.一种肝脏高转移胰腺癌细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，所述胰腺癌肝转移灶的制备方法包括：将胰腺癌细胞导入动物脾脏被膜下，10～31天后分离得到胰腺癌肝转移灶。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述贴壁培养的培养基包括2～4mm的l-谷氨酰胺，1000～4500mg/l的葡萄糖，1.0～1.2mm的丙酮酸钠，2200～4000mg/l的碳酸氢钠，2％～20％胎牛血清和1％抗生素；所述消化采用0.2％～0.3％胰酶；所述静置的时间为1～5min。

4.根据权利要求1～3任一构建方法得到的肝脏高转移胰腺癌细胞系。

5.一种肝脏高转移胰腺癌细胞株，其特征在于，所述肝脏高转移胰腺癌细胞株命名为panc02-h7，分类命名为鼠源胰腺癌细胞，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2024年05月07日，保...

【专利技术属性】
技术研发人员：褚翔宇，李东奇，龙迪，杨延莲，王琛，田孝东，
申请(专利权)人：北京大学第一医院北京大学第一临床医学院，
类型：发明
国别省市：