【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程,特别涉及蛋白复合物及其在植物基因编辑中的应用。
技术介绍
1、基因组编辑(genome editing)又称基因组工程,是基因工程的一种,指在活体基因组中进行dna插入、删除、修改或替换的一项技术。归巢核酸内切酶、锌指核酸酶(zfns)、转录激活因子样效应物核酸酶(talens)、crispr/cas核酸酶、is200/is605转座酶常用于基因编辑。核酸酶在dna的特异位点产生双链dna断裂,随后经由非同源性末端连接(nhej)、微同源末端连接(mmej)或同源重组(hr)修复断裂,在此过程中引入碱基改变。
2、在植物系统中,将基因编辑蛋白表达载体导入植物细胞的有效方法主要由农杆菌介导。在此基础上,不同实验室针对植物系统影响编辑效率的关键因素如sgrna序列、多靶点构建、snorna启动子选择、核酸酶驱动启动子、核酸酶蛋白表达增强、核酸酶变体或同源蛋白的选择等进行了一系列探索和优化。但这些方法对于一些植物基因(例如水稻基因loc_os05g27980、loc_os03g47200、loc_os12g
...【技术保护点】
1.一种蛋白复合物在植物基因编辑中的应用,其特征在于,所述蛋白复合物用于植物基因片段的编辑;所述蛋白复合物包括基因编辑蛋白和双链DNA结合蛋白;所述双链DNA结合蛋白融合在所述基因编辑蛋白的N端或C端。
2.根据权利要求1所述的蛋白复合物,其特征在于,所述双链DNA结合蛋白为Sso7d、Sac7d、HMF-like proteins、PCNA homologs、helix-hairpin-helix domains、dCL、dCE中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的蛋白复合物,其特征在于,所述基因编辑蛋白为归巢核酸内切酶、锌指核酸酶(ZFN
...【技术特征摘要】
1.一种蛋白复合物在植物基因编辑中的应用,其特征在于,所述蛋白复合物用于植物基因片段的编辑;所述蛋白复合物包括基因编辑蛋白和双链dna结合蛋白;所述双链dna结合蛋白融合在所述基因编辑蛋白的n端或c端。
2.根据权利要求1所述的蛋白复合物,其特征在于,所述双链dna结合蛋白为sso7d、sac7d、hmf-like proteins、pcna homologs、helix-hairpin-helix domains、dcl、dce中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的蛋白复合物,其特征在于,所述基因编辑蛋白为归巢核酸内切酶、锌指核酸酶(zfns)、转录激活因子样效应物核酸酶(talens)、crispr/cas核酸酶、is200/is605转座酶中的一种。
4.根据权利要求3所述的蛋白复合物,其特征在于,所述crispr/cas核酸酶为crispr/cas9、crispr/cas12a、crispr/cas12b、crispr/cas12f1核酸酶中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的蛋白复合物,其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员:易良华,李阳,刘震,郭建行,李杨,金杰,郑义,
申请(专利权)人:武汉伯远生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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