一种用于制备重组人白蛋白的重组工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于制备重组人白蛋白的重组工程菌及其应用，涉及生物化学领域，具体地，涉及基因工程技术和微生物领域。本发明专利技术通过在表达重组人白蛋白的同时，利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术靶向敲除SCW10、UTH1中的一种或多种基因和/或将BGL2、RCE3中的一种或多种基因过表达整合至菌株中，从而提高重组人白蛋白的表达量。本发明专利技术的重组工程菌可使重组人白蛋白的产量显著提高，最高可达374%，具备广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物化学领域，具体地，涉及基因工程技术及微生物领域，尤其涉及一种用于制备重组人白蛋白的重组工程菌及其应用。

技术介绍

1、酵母是模式真核生物，遗传操作简单、蛋白质翻译后修饰和分泌途径较完备、生长速度快、营养要求低、适于大规模高密度发酵。随着对大量不同异源蛋白在酵母中分泌表达的研究发现，不同蛋白的表达量差异较大，有些异源蛋白质分泌能力有限，限制了蛋白质的生产效率。通过基因操作改良蛋白质生物合成、分泌机制的关键基因，是提高异源蛋白质生产效率的重要手段。

2、细胞壁是酵母细胞的重要组成部分，是细胞与外界隔离的屏障，维持细胞形态，并在细胞生长、分裂、条件应激、细胞融合交配以及维持细胞完整性等方面发挥关键作用。

3、酵母细胞壁主要由甘露糖蛋白、β-葡聚糖和少量的几丁质组成。酵母细胞壁β-葡聚糖是一种多分支聚合物，主链以β-1,3-糖苷键连接，通过β-1,6-糖苷键进行分支，形成一个网络状结构。几丁质是由n-乙酰氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键聚合而成。甘露糖蛋白可以先通过共价键和细胞壁的β-1,6葡聚糖连接，再通过β-1,6葡聚本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于制备重组人白蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌在表达重组人白蛋白的同时，还包含如下操作：利用CRISPR-Cas9基因编辑技术靶向敲除SCW10、UTH1中的一种或多种基因，和/或将BGL2、RCE3中的一种或多种基因过表达整合至菌株中。

2.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述SCW10基因所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述UTH1所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述BGL2基因所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述RCE3基因所编码的氨基酸序列如SEQ IDNO.8所示。

3.根...

【技术特征摘要】

1.一种用于制备重组人白蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌在表达重组人白蛋白的同时，还包含如下操作：利用crispr-cas9基因编辑技术靶向敲除scw10、uth1中的一种或多种基因，和/或将bgl2、rce3中的一种或多种基因过表达整合至菌株中。

2.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述scw10基因所编码的氨基酸序列如seq id no.2所示；所述uth1所编码的氨基酸序列如seq id no.4所示；所述bgl2基因所编码的氨基酸序列如seq id no.6所示；所述rce3基因所编码的氨基酸序列如seq idno.8所示。

3.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述scw10基因核苷酸序列如seqid no.1所示；所述uth1基因核苷酸序列如seq id no.3所示；所述bgl2基因核苷酸序列如seq id no.5所示；所述rce3基因核苷酸序列如seq id no.7所示。

4.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：项炜，韩旭，管廷臣，龚国利，
申请(专利权)人：通化安睿特生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：