基于转运分泌途径制备重组人白蛋白的重组工程菌及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于转运分泌途径制备重组人白蛋白的重组工程菌及应用，涉及基因工程技术领域。本发明专利技术通过基因重组技术将内质网相关基因SRP54、ERJ5，囊泡转运相关基因YOS1、SLY1，高尔基体相关基因GOS1、YIP1中的一种或多种整合至重组工程菌基因组中，从而实现重组人白蛋白的高效分泌表达。本发明专利技术提供的方法，显著提高了重组人白蛋白的表达量，具备广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及基因工程，尤其涉及一种基于转运分泌途径制备重组人白蛋白的重组工程菌及应用。

技术介绍

1、毕赤酵母是发酵工业最广泛使用的模式微生物之一，以其为宿主的外源基因表达系统近年来发展迅速，广泛应用于生物医药、化妆品、饲料、工业酶制剂及基础研究等各个领域，在众多分泌表达系统中具有优势。毕赤酵母表达系统分泌途径主要为：目的基因转录成mrna后，在核糖体上合成新生肽链，通过内质网膜上的蛋白通道转运至内质网中进行折叠修饰，经由分泌系统中的质检元件检测正确折叠后，再被运输到高尔基体中进行糖基化修饰，形成特定结构并具有功能的蛋白质，最后通过囊泡运输分泌到细胞外。

2、随着科技的发展，提高异源蛋白质分泌的方法逐渐增多，其中最为传统的方法为提高重组蛋白编码基因拷贝数。理论上随着目的基因拷贝数的增加，蛋白表达量应随之增加；但然而，在实践过程中，当拷贝数增至一定数目时，由于转运分泌途径受阻等因素影响，限制了蛋白质的生产效率，其表达量反而下降，不利于实现增产的目的。

3、随着对异源蛋白在酵母中分泌表达的研究发现，不同蛋白的表达量差异较大，有些异源蛋白质本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于转运分泌途径制备重组人白蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌在表达重组白蛋白的同时，还包括如下操作：通过基因重组技术将内质网相关基因、囊泡转运相关基因、高尔基体相关基因中的一种或多种重组表达盒整合至重组工程菌基因组中，其中：

2.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述SRP54基因所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述ERJ5基因所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述YOS1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述SLY1基因所编码的氨基酸序列如SEQ IDNO.7所示；所述GOS1基因所编码的氨基酸序列...

【技术特征摘要】

1.一种基于转运分泌途径制备重组人白蛋白的重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌在表达重组白蛋白的同时，还包括如下操作：通过基因重组技术将内质网相关基因、囊泡转运相关基因、高尔基体相关基因中的一种或多种重组表达盒整合至重组工程菌基因组中，其中：

2.根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述srp54基因所编码的氨基酸序列如seq id no.1所示；所述erj5基因所编码的氨基酸序列如seq id no.3所示；所述yos1基因编码的氨基酸序列如seq id no.5所示；所述sly1基因所编码的氨基酸序列如seq idno.7所示；所述gos1基因所编码的氨基酸序列如seq id no.9所示；所述yip1基因所编码的氨基酸序列如seq id no.11所示。

3. 根据权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述srp54基因核苷酸序列如seqid no.2所示；所述erj5基因核苷酸序列如seq id no.4所示；所述yos1基因核苷酸序列如seq id no.6所示；所述sly1基因核苷酸序列如seq id no.8所示；所述gos1基因核苷酸序列如seq id no.10所示；所述yip1基因核苷酸序列如seq i...

【专利技术属性】
技术研发人员：项炜，韩旭，姜钧茹，李爽，龚国利，
申请(专利权)人：通化安睿特生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：