组成型表达用新型启动子变异体及其用途制造技术

本发明专利技术提供在大肠杆菌(Escherichia coli)的tatA(双精氨酸转位酶A(twin arginine translocase A))基因启动子中插入、缺失或取代一部分核苷酸的新型启动子变异体。本发明专利技术的新型启动子变异体可以组成型地高水平表达目标蛋白质，尤其可以在大肠杆菌中组成型地高水平表达酶。因此，在利用由包含本发明专利技术的新型启动子变异体表达载体转化的重组菌株的情况下，可以经济地大量生产目标蛋白质，尤其是酶。例如，在利用由包含本发明专利技术的新型启动子变异体的表达载体转化的重组菌株的情况下，可以经济地大量生产阿洛酮糖差向异构酶或从果糖经济地大量生产阿洛酮糖。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及新型启动子变异体等，更详细地，涉及能够组成型地高水平表达目标蛋白质的新型启动子变异体及其多种用途。

技术介绍

1、随着分子生物学的发展，查明了多种调节基因的表达的机制。基因的表达是指通过在细胞中发生的转录(transcription)及翻译(translation)并根据输入到基因中的密码来合成蛋白质的一系列过程。尤其，转录过程作为基因表达的初期阶段，通过核糖核酸(rna)聚合酶在多种辅助因子的帮助下与存在于基因的上游的启动子(promoter)序列结合来开始，转录因子(tf，transcription factor)为上述辅助因子中的一种，已知与启动子序列直接结合。尤其在原核生物中，基因表达的调节主要在转录阶段发生，不断有新的转录因子及启动子被研究人员发现。

2、产业上为了生产酶等外源性蛋白质，主要使用通过由包含外源性蛋白质基因pet型的表达载体转化的大肠杆菌等原核生物来制备的转化体作为表达系统。由pet型的表达载体转化的原核生物表达系统通常需要异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(iptg，isopropyl-β-d-thiogala本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种启动子变异体，其特征在于，由序列9的碱基序列或序列10的碱基序列构成。

2.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子变体。

3.一种表达载体，其特征在于，包含编码目标蛋白质的多核苷酸以及与其可操作地连接的权利要求1所述的启动子变异体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，上述目标蛋白质为酶。

5.根据权利要求4所述的表达载体，其特征在于，上述酶为阿洛酮糖差向异构酶。

6.根据权利要求5所述的表达载体，其特征在于，上述阿洛酮糖差向异构酶由序列3的氨基酸序列、序列5的氨基酸序列或序列7的氨基酸序列构成。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种启动子变异体，其特征在于，由序列9的碱基序列或序列10的碱基序列构成。

2.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子变体。

3.一种表达载体，其特征在于，包含编码目标蛋白质的多核苷酸以及与其可操作地连接的权利要求1所述的启动子变异体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，上述目标蛋白质为酶。

5.根据权利要求4所述的表达载体，其特征在于，上述酶为阿洛酮糖差向异构酶。

6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔银硕，李芝河，
申请(专利权)人：大象株式会社，
类型：发明
国别省市：