一种基于GO与HCR的多色荧光同时检测ATP、miRNA-21的方法及细胞成像方法技术

技术编号:42454462 阅读:38 留言:0更新日期:2024-08-21 12:45
本发明专利技术公开了一种基于GO与HCR的多色荧光同时检测ATP、miRNA‑21的方法及细胞成像方法,属于生物检测领域。其包括:将ATP核酸适体和能被miRNA‑21触发发生杂交链式反应的发夹探针一端修饰不同荧光基团,加入至氧化石墨烯GO溶液中孵育,利用GO作为载体,将DNA探针运载至细胞中,进行检测;当ATP核酸适体修饰的荧光基团发出荧光时,表明细胞中含有ATP;当发夹探针修饰的荧光基团发出荧光时,表明细胞中含有miRNA‑21;当ATP核酸适体以及发夹探针修饰的荧光基团均发出荧光,表明细胞中含有ATP和miRNA‑21。本发明专利技术提供的方法能够用于活体细胞中同时或单独检测miRNA‑21和ATP,特异性好、检测限低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,更具体地,涉及一种基于go与hcr的多色荧光同时检测atp、mirna-21的方法及细胞成像方法。


技术介绍

1、mirna-21是一种重要的生物标志物,它与许多癌症都密切相关,例如它在乳腺癌、肝癌、肺癌等癌细胞中都有比较高的表达。三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,atp)是生物体中重要的能量来源,常被称作“能量货币”。正常人体内atp浓度在1mm~10mm,而atp浓度异常往往警示一些疾病的发生,例如恶性肿瘤、炎症、心脑血管疾病等疾病,这些疾病患者体内atp浓度通常超出正常水平。因此,检测人体内mirna-21以及atp浓度可以对疾病进行早期诊断及治疗,可有效减少疾病发生率或提高疾病患者治愈率。

2、目前,对多种生物标志物进行同时检测的方法有基于hcr与go同时对mirna-21以及let-7a进行多色荧光检测(l.li,j.feng,h.liu,q.li,l.tong andb.tang,chem.sci.,2016,7,1940–1945)、利用核酸适体和go同时对atp以及gtp进行检测等本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于GO与HCR的多色荧光同时检测ATP、miRNA-21的方法,其特征在于,包括:将ATP核酸适体和能被miRNA-21触发发生杂交链式反应的发夹探针一端修饰不同荧光基团,加入至氧化石墨烯GO溶液中孵育,利用GO作为载体,将DNA探针运载至细胞中,进行检测;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述ATP核酸适体的寡核苷酸序列为:AACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述ATP核酸适体的5’端修饰Tamara荧光基团。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发夹...

【技术特征摘要】

1.一种基于go与hcr的多色荧光同时检测atp、mirna-21的方法,其特征在于,包括:将atp核酸适体和能被mirna-21触发发生杂交链式反应的发夹探针一端修饰不同荧光基团,加入至氧化石墨烯go溶液中孵育,利用go作为载体,将dna探针运载至细胞中,进行检测;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述atp核酸适体的寡核苷酸序列为:aacctgggggagtattgcggaggaaggt。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述atp核酸适体的5’端修饰tamara荧光基团。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发夹探针包括h1和h2;

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述发夹探针的一端的荧光基团为fam基团,分别修饰于h1的3’端与h2的5’...

【专利技术属性】
技术研发人员:邹轶卢丹青黄杨茜徐小婷肖倩易明星
申请(专利权)人:湖南省计量检测研究院
类型:发明
国别省市:

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