一种基于RPA-LFD的小麦矮腥黑穗病菌可视化快速检测方法技术

本发明专利技术提供了一种基于RPA‑LFD的小麦矮腥黑穗病菌可视化快速检测方法，该方法为：提取小麦麦穗菌瘿冬孢子DNA，得到样品DNA；以S1中得到的样品DNA为模版，按照胶体金试纸条型DNA恒温快速扩增试剂盒的说明书配置反应液，反应液为：冻干粉，A buffer 29.4μL，10μmol·L<supgt;‑1</supgt;正向引物TCKRPA‑F 2μL，10μmol·L<supgt;‑1</supgt;反向引物TCKRPA‑R 2μL，0.1μmol·L<supgt;‑1</supgt;nfo探针0.6μL，核酸模板2μL,ddH<subgt;2</subgt;O 11.5μL，B buffer2.5μL；在温度为38℃的恒温金属浴中反应10min，反应结束后，吸取10μL反应产物加入超纯水稀释至100μL，取50μL稀释后的反应产物滴于加样孔，5分钟内观察质控线与检测线判断检测结果。本发明专利技术利用RPA‑LFD对小麦矮腥黑穗病菌进行高效准确的鉴定，利用RPA技术简化检验检疫流程，使检测结果可视化、实际操作简便化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于小麦矮腥黑穗病菌检测，具体涉及一种基于rpa-lfd的小麦矮腥黑穗病菌可视化快速检测方法。

技术介绍

1、小麦(triticum aestivum l.)属于禾本科小麦属，是我国的第二大粮食作物。小麦矮腥黑穗病(wheat dwarf bunt)是由小麦矮腥黑穗病菌(tilletia.controversa kühn)侵染而引发的严重的系统侵染性小麦病害，它不仅是我国的检疫性病害，更是一种非常重要的国际检疫性小麦病害。作为极难防治的国内外重要检疫性病害之一，小麦矮腥黑穗病的发生对于小麦的生产安全具有极大危害。小麦矮腥黑穗病作为一种典型的土传病害，通过侵染小麦引起植株感染病菌，致使小麦植株整体矮化、分蘖增多，整穗麦粒均为黑穗菌瘿，造成产量损失严重，目前还没有有效的防治方法，其感染后的发病率即为小麦产量损失率。除产量损失外，其冬孢子菌瘿中含有对人畜毒性极强三甲胺类物质，会散发出强烈的“鱼腥味”刺激气味，人畜误食会存在中毒风险。小麦矮腥黑穗病病害风险评估表明，tck冬孢子的萌发和侵染需要较长时间的低温，中国的冬小麦种植区有19.3％属中、高风险区，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于RPA-LFD的小麦矮腥黑穗病菌可视化快速检测方法，其特征在于，该方法为：

【技术特征摘要】

1.一种基于rpa-lfd的小麦矮腥黑穗病菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：李强，黄洁，崇钰，王保通，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：