催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系及其应用，该检测体系包含：具有发夹结构的探针epH1和epH2，探针epH1和epH2的茎部的序列互补，靶标miRNA与探针epH1茎部的序列互补，且探针epH2的茎部末端连接有长度为10～12nt的串联重复序列，该串联重复序列能够完全或部分与其自身互补。本发明专利技术的催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系能够直接、快速、灵敏检测miRNA，仅需针对miRNA设计两条探针epH1和epH2，且探针epH2包含一条嵌入式引物即可实现靶标信号的双重信号快速放大，无需PCR仪的精确控温过程。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种核酸检测体系，具体涉及一种催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系及其应用。

技术介绍

1、灵敏度是评价临床分析结果实用性的关键指标。对于具有潜在应用价值的检测系统，可以从信号输入(涉及靶标识别和富集)和输出(涉及信号转换和放大)两个方面提高灵敏度。通常，耦联多个信号放大系统并产生大量与检测靶标相关的信号是提高灵敏度的有效方法。就核酸检测系统而言，代表性的靶标信号转换和放大策略主要包括核酸扩增(需要dna聚合酶参与)和dna自组装(无需dna聚合酶)。

2、近年来，具有优异靶标识别能力和易于设计的dna自组装在即时检测(point-of-care test，poct)中显示出很大的应用前景。典型的dna自组装信号放大系统包括催化发夹组装(catalytic hairpin assembly，cha)和杂交链反应(hybridization chainreaction，hcr)。这些无需酶参与的dna杂交反应通常使用两个或多个发夹结构探针，并可由单链核酸(如mirna)触发。然而，真实样品中mirna的丰度往本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系，其特征在于，该检测体系包含：具有发夹结构的探针epH1和epH2，探针epH1和epH2的茎部的序列互补，靶标miRNA与探针epH1茎部的序列互补，且探针epH2的茎部末端连接有长度为10～12nt的串联重复序列，该串联重复序列能够完全或部分与其自身互补。

2.根据权利要求1所述的核酸检测体系，其特征在于，该检测体系还包含：带有链置换活性的DNA聚合酶。

3.根据权利要求2所述的核酸检测体系，其特征在于，所述DNA聚合酶选自Bst DNA聚合酶、Phi29 DNA聚合酶。</p>

4.根据...

【技术特征摘要】

1.一种催化发夹自组装与嵌入式引物触发的等温扩增相偶联的核酸检测体系，其特征在于，该检测体系包含：具有发夹结构的探针eph1和eph2，探针eph1和eph2的茎部的序列互补，靶标mirna与探针eph1茎部的序列互补，且探针eph2的茎部末端连接有长度为10～12nt的串联重复序列，该串联重复序列能够完全或部分与其自身互补。

2.根据权利要求1所述的核酸检测体系，其特征在于，该检测体系还包含：带有链置换活性的dna聚合酶。

3.根据权利要求2所述的核酸检测体系，其特征在于，所述dna聚合酶选自bst dna聚合酶、phi29 dna聚合酶。

4.根据权利要求1所述的核酸检测体系，其特征在于，该检测体系还包含：嵌入型核酸荧光染料。

5.根据权利要求1所述的核酸检测体系，其特征在于，所述嵌入型核...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺洪飞，张雪文，罗光成，郭斌，吕家臻，郭晓兰，
申请(专利权)人：川北医学院，
类型：发明
国别省市：