一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗及其抗原制备方法技术

技术编号:42369673 阅读:102 留言:0更新日期:2024-08-16 14:51
本发明专利技术涉及生物医学领域,具体涉及一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗及其抗原制备方法。现有技术存在口服重组蛋白疫苗耐受性低和抗原被稀释、降解甚至变性失活的技术问题。本发明专利技术提供一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗及其抗原制备方法,通过本发明专利技术的制备方法,纯化后其蛋白纯度达到90%以上,每升发酵液的产率可以获得96mg蛋白,且动物实验证明其有效刺激机体产生免疫应答并具备良好的免疫保护作用,经过免疫保护实验,其保护率达到80%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域,具体涉及一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗及其抗原制备方法


技术介绍

1、幽门螺杆菌(helicobacter pylori,hp)是一种革兰阴性、螺杆状、微需氧菌,可以在胃、黏膜和十二指肠上皮持续存在。1982年澳大利亚学者marshall和warren首次报道了从慢性胃炎和胃溃疡患者的胃黏膜中分离出幽门螺旋杆菌,是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种类。已有大量研究证实,hp是胃肠道疾病的常见病原体,是慢性b型胃炎、胃和十二指肠溃疡的主要病因。hp也是胃肠癌、胃黏膜淋巴组织淋巴癌的关键病因,通过对细胞内信号的调控引起胃上皮细胞的遗传不稳定,影响dna损伤修复系统,促进了胃上皮细胞的肿瘤转化[i]。1994年国际癌症研究中心就将其列为首要i类胃癌的致癌因子[ii]。2017年世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单显示,幽门螺杆菌属于i类致癌物,可诱发胃癌和淋巴增生性胃淋巴瘤等肿瘤。

2、hp感染在全世界各地人群中感染率均较高,全球感染率超过50%,主要集中在非洲和巴西等发展中国家,而欧洲、日本和韩国等发达国家本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗,其特征在于,所述疫苗包括抗原和佐剂,所述抗原为HpaA,所述佐剂为CpG1018,所述HpaA的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,所述S1中表达载体为pET-29b(+),重组工程菌为pET-HpaA/BL21。

4.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,所述S2包括以下子步骤:

5. 根据权利要求2...

【技术特征摘要】

1. 一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗,其特征在于,所述疫苗包括抗原和佐剂,所述抗原为hpaa,所述佐剂为cpg1018,所述hpaa的氨基酸序列如seq id no:1所示。

2.一种幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,所述s1中表达载体为pet-29b(+),重组工程菌为pet-hpaa/bl21。

4.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,所述s2包括以下子步骤:

5. 根据权利要求2所述的幽门螺杆菌口服重组蛋白疫苗的抗原的制备方法,其特征在于,所述s21、s22、s24结束后取菌液样品做纯菌检查和镜检,细菌为革兰氏阴性杆菌,s21、s22、s23、s25结束后菌液od600值分别为大于1.50、大于1.50、20.00、不超过1.00;所述s23菌液od600在10.00时开始以0.015 l/分钟补加甘油,直到诱导结束;所述s24诱导开始时以0.02 l/分钟补加浓缩培养基。

【专利技术属性】
技术研发人员:李建霖董重漆熠樊钒税静吴强陈克平李小璟赵丹张玲王萌孙巍吴静
申请(专利权)人:成都欧林生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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