一种获得狐尾藻转基因植株的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速高效的狐尾藻转基因的方法，包括以下步骤：（1）选择消毒的茎段为外植体，在MS+6‑BA 1～2mg/L+KT 0.1～0.5mg/L+IAA 0.1~0.5mg/L+NAA 0.1~1mg/L的琼脂固体培养基上培养，诱导出大量小丛芽；（2）茎段在农杆菌菌液中共培养3d；（3）将共培养完成后的狐尾藻茎段在筛选培养基中培养筛选抗性苗；（4）抗性苗的生根培养；（5）将步骤（4）中的抗性生根苗移栽，并进行PCR检测，筛选出转基因成功的植株。本发明专利技术由茎段直接诱导出大量小丛芽，避免了诱导愈伤再分化的过程，显著节省时间，提高快繁的效率。用菌液共培代替固体共培，更能保证农杆菌与外植体充分接触，进而提高了转化效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于狐尾藻转基因的，具体涉及一种农杆菌介导的高效的狐尾藻转基因方法。

技术介绍

1、狐尾藻（ myriohpyllum verticillatum）为小二仙草科狐尾藻属植物，水生草本，世界各地广有分布。狐尾藻不仅是鱼虾蟹养殖过程中的饵料、避难和产卵场所，也是目前湖泊生态修复工程中的净水物种和植被恢复先锋物种，此外因狐尾藻粗蛋白含量高，具有制备成青贮饲料用以家禽家畜饲养的潜力。

2、转基因技术是指利用分子生物学方法，将来源于不同生物或同种生物的有利基因导入到目标生物中，使目标生物在原有遗传特性基础上增加新的功能特性，获得新的品种，生产新的产品。转基因农作物新品种研发已从抗虫、抗除草剂等第一代产品，向改善营养品质和提高产量的第二代产品转变。目前常见的植物转基因方法有三种：农杆菌介导转化法、基因枪介导转化法、花粉管通道法；目前最常见的转基因方法是农杆菌介导转化法，其存在一个限制因素：即待转化植株需通过无菌培养先诱导愈伤组织，经农杆菌浸染共培后再筛选抗性愈伤并诱导植株再生和生根，转化率低且不通本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（1）中是将外植体茎段剪成长2～4cm的规格，用洗衣粉清洗干净，在无菌操作台上用无菌水洗5～7次，然后用70%酒精浸润30s，放入汞质量百分比浓度为0.1%的升汞溶液中灭菌10～15min，再用无菌水冲洗5～6次，备用。

3.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（1）所述继代培养时，是将老茎剪成2～4cm长短，丛芽切成0.5cm×0.5cm，转入与步骤（1）相同的培养基中，每隔28~30d继代一次。...

【技术特征摘要】

1.一种获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（1）中是将外植体茎段剪成长2～4cm的规格，用洗衣粉清洗干净，在无菌操作台上用无菌水洗5～7次，然后用70%酒精浸润30s，放入汞质量百分比浓度为0.1%的升汞溶液中灭菌10～15min，再用无菌水冲洗5～6次，备用。

3.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（1）所述继代培养时，是将老茎剪成2～4cm长短，丛芽切成0.5cm×0.5cm，转入与步骤（1）相同的培养基中，每隔28~30d继代一次。

4.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（2）的具体过程如下：

5.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，步骤（3）中筛选培养的时间是10～15d。

6.根据权利要求1所述的获得狐尾藻转基因植株的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏新界，荆风雪，
申请(专利权)人：湖南新春农业生物高科技有限公司，
类型：发明
国别省市：