【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物催化合成,具体涉及一种多酶级联合成羟基酪醇的方法。
技术介绍
1、羟基酪醇(hydroxytyrosol),化学名为3,4-二羟基苯乙醇,是一种多羟基酚类化合物,具有抗氧化、抗癌、抗真菌等多种生物学活性,广泛应用于食品、化妆品及医药行业。羟基酪醇的市场价值在2030年将达到25亿美元,并以每年超过20%的增长速率递增。鉴于羟基酪醇巨大的市场价值,其合成方法逐渐引起研究人员的关注。目前羟基酪醇工业化生产方法主要通过两种方式:从橄榄叶中提取以及化学法合成,虽然这两种方法都可以实现羟基酪醇的高效合成,但是都存在反应步骤繁琐、产物收率低和产生大量酸性废水等问题,违背了可持续发展和绿色化学的原则。
2、生物法合成羟基酪醇,由于具有反应条件温和和不产生有机废水等优势,成为合成羟基酪醇最具应用潜力的合成路线。对于起始原料选择,有两种不同的策略,其一是使用葡萄糖或甘油等一些简单的碳源为原料,通过代谢工程的策略,将代谢流引入羟基酪醇的合成途径中,简单碳源虽具廉价易得等优点,但该策略必须使用活细胞,且涉及众多机体内复杂的代谢网
...【技术保护点】
1.一种多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,3,4-二羟基苯甲醛、L-苏氨酸、甲酸钠、NAD+、葡萄糖通过L-苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶、苯丝氨酸脱水酶、α-酮酸脱羧酶、醛还原酶、葡萄糖脱氢酶的级联催化合成羟基酪醇。
2.根据权利要求2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
3.根据权利要求1或2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,酶反应在磷酸盐缓冲液中进行。
4.根据权利要求1或2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,酶反应过程中还添加PLP。
5.根据权利要求
...【技术特征摘要】
1.一种多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,3,4-二羟基苯甲醛、l-苏氨酸、甲酸钠、nad+、葡萄糖通过l-苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶、苯丝氨酸脱水酶、α-酮酸脱羧酶、醛还原酶、葡萄糖脱氢酶的级联催化合成羟基酪醇。
2.根据权利要求2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
3.根据权利要求1或2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,酶反应在磷酸盐缓冲液中进行。
4.根据权利要求1或2所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,酶反应过程中还添加plp。
5.根据权利要求1所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,所述l-苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶来自于采用基因工程手段共表达l-苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌全细胞或细胞破碎液,或者为各自表达l-苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌全细胞或细胞破碎液。
6.根据权利要求1所述的多酶级联合成羟基酪醇的方法,其特征在于,所述苯丝氨酸脱水酶、α-酮酸脱羧酶、醛还原酶、葡萄糖脱氢酶来...
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