一种构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种构建人源化β‑珠蛋白基因猪受精卵的方法及应用，采用CRISPR/Cas9基因编辑及同源重组技术，将人β‑珠蛋白基因定点插入猪β‑珠蛋白基因位点，制备出人源化β‑珠蛋白基因的猪受精卵。为进一步建立人源化β‑地中海贫血猪模型奠定坚实基础，进而为β‑地中海贫血的发病机制及疾病治疗等研究提供有力的实验工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体涉及一种构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的方法及应用。

技术介绍

1、β-地中海贫血是一种严重的遗传性血液性疾病，由于患者的β珠蛋白基因突变或者缺失导致β珠蛋白链的缺失或不足，最终引起溶血性贫血。儿童骨髓移植是目前治疗β-地中海贫血的唯一疗法。造血干细胞移植通常在低风险人群中取得良好的结果。另外，自从基因编辑技术出现以来，基因治疗是地中海贫血患者未来最有希望的治疗方法。上述各种治疗方法均需有相应的动物模型才能验证其治疗效果的优劣及是否有副作用。目前用于研究β-地中海贫血的动物模型主要有体外细胞增值培养模型和传统的动物实验室模型。相比于这两种模型，人源化动物模型可以更广泛并且更精确的研究人类临床疾病的病理药理等特征，它具有人类血液、细胞、组织或器官，或者能够表达人类基因的动物模型。这类人源化动物模型被认为是在人类疾病发生发展过程中，在免疫医学基础研究、临床应用研究、基因治疗、干细胞治疗以及药物评估的最佳模型动物工具。小鼠是目前唯一可供研究的人源化β-地中海贫血疾病动物模型，但小鼠不论从体型、器官大小、生理、病理等方面都与人相差巨大本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵，其特征在于，猪β-珠蛋白基因位点区域的5’同源臂和3’同源臂的核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。

2.根据权利要求1所述构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的构建方法，其特征在于，是将人β-珠蛋白基因插入猪β-珠蛋白基因位点，获得人β-珠蛋白基因的猪受精卵，所述插入的人β-珠蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。

3.根据权利要求2所述的构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的方法，其特征在于，使用靶向猪β-珠蛋白基因的sgRNA进行猪受精卵的构建，所述靶向猪β-珠蛋白基因的sgRNA的核苷...

【技术特征摘要】

1.一种构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵，其特征在于，猪β-珠蛋白基因位点区域的5’同源臂和3’同源臂的核苷酸序列如seq id no：3和seq id no：4所示。

2.根据权利要求1所述构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的构建方法，其特征在于，是将人β-珠蛋白基因插入猪β-珠蛋白基因位点，获得人β-珠蛋白基因的猪受精卵，所述插入的人β-珠蛋白基因的核苷酸序列如seq id no：5所示。

3.根据权利要求2所述的构建人源化β-珠蛋白基因猪受精卵的...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐小川，陆小丹，柒依琦，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：